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miR--14--3p对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的调控作用.pdf
目 录
呲Y㈣盯呲7哪2㈣3㈣心 哪6 皇
目 录
摘要……………………………………………………………………………………………………………………………一I
英文摘要………………………………………………………………………………………III
1前言…………………………………………_………………………………………………l
1.1miRNAS的研究进展……………………………………………………………………….1
1.1.1
miRNAs的发现………………………………………………………………………】
1.1.2
miRNAs合成和作用机制……………………………………………………………1
1.1.3
miRNAs的检测技术……………一…………………………………………………..2
1.1.4
miRNAs与奶牛乳腺发育的研究现状……………………………………………….3
1.2miR.142.3P的研究进展………………………………………………………………….4
】.3 PRLR的研究进展………………………………………………………………………一4
1.4研究的目的和意义……………………………………………………………………….4
2材料与方法…………………………………………………………………………………一5
2.I实验材料…………………………………………………………………………………一5
2.2主要仪器和设备………………………………………………………………………….5
2.3实验试剂和耗材………………………………………………………………………….6
2.4实验方法与步骤…………………………………………………………………………7
2.4.1miR.142.3p在不同乳品质奶牛乳腺组织中的表达状况……………………………10
2.4.2奶牛乳腺组织中PRLR定位及表达状况……………………………………………7
2.4.3
miR.142.3p靶基因的预测………………………………………………………….10
2.4.4奶牛乳腺上皮细胞培养和鉴定……………………………………………………一lO
2.4.5 mimics转染对奶牛乳腺上皮细胞的影响………………………………12
miR.142.3p
2.4.6 inhibitor转染对奶牛乳腺上皮细胞的影响……………………………18
miR.142.3p
2.5数据处理与统计分析……………………………………………………………………19
3结果……………………………………………………………………………………………………………………….20
3.1miR一142.3p在不同乳品质奶牛乳腺组织中的表达…………………………………….20
3.2不同乳品质奶牛乳腺组织中PRLR定位及表达情况…………………………………一20
3.3miR.142.3p的靶基因的预测……………………………………………………………2l
3.4奶牛乳腺上皮细胞的培养和鉴定………………………………………………………2l
3.5 mimcs转染后对奶牛乳腺上皮细胞的影响………………………………..23
miR.142.3p
3.5.1miR-142—3p
…………….…….…………………..……….….……………….………….…………………………………………:13
3.5.2 mimics转染后奶牛乳腺上皮细胞中PRLR的表达变化………………24
miR.142-3p
3.5.3 mimics转染后奶牛乳腺上皮细胞中PRLR蛋白及泌乳通路蛋白的表达
miR一142-3p
变化.…….…………………….………………………………………………………………………………..24
3.5.4
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