两种淡水龟微卫标记的筛选及乌龟养殖群体遗传多样性分析.pdfVIP

‘I嘲嬲 两种淡水龟微卫星标记的筛选及乌龟养殖群体遗传多样性 分析 摘要 reevesii)是我国的广布种，国外分布于日本和朝鲜，具有 乌龟(Chinemys 很高的食用和药用价值，其人工养殖在我国非常广泛。黄喉拟水龟(Mauremys mutica)是我国南方常见龟类之一，国外分布于越南和日本，是培植绿毛龟的优 选品种，集美食、保健、药用与观赏于一身，受到消费者青睐，是当前龟类养殖 的热门品种之一。由于生态平衡破坏、农药大量使用及人为滥捕等因素的影响， 两种淡水龟类的野生资源明显减少，种质资源也面临着严重危机。乌龟在中国红 皮书中被列为依赖保护，在IUCN和中国物种红色名录中被列为濒危(EN)等 级；黄喉拟水龟在中国红皮书、中国物种红色名录以及IUCN中，都被列为濒危 等级。 乌龟和黄喉拟水龟都是我国龟类养殖的热门品种，带动了我国地区经济的发 展。另外，对于不存在“家化”问题的淡水龟来说，人工养殖就是一种迁地保护， 这在很大程度上保护了野生龟资源。目前为止，人们对这两种龟类的种质资源尚 不清楚，也缺乏遗传方面的信息。这与野生龟资源急剧减少、人工养殖迅猛发展 的趋势相比，理论方面的研究明显不能满足生产实践的需要，这不仅阻碍了对该 物种野生资源的有效保护，而且也极大地制约了其规模化养殖和产业的可持续发 展。本实验通过磁珠富集法和FIASCO法对两种淡水龟进行了微卫星标记的开 发，并对乌龟养殖群体进行了遗传多样性分析，以期能够为其保护和养殖业的发 展提供理论基础。主要研究结果如下： 1．利用磁珠富集法成功筛选出8个具有多态性的乌龟微卫星位点。这8个微 经过连续的Bonferroni校正，有3个位点显著偏离了哈迪．温伯格平衡 是由无效等位基因引起。在连锁不平衡检测当中，所有位点都是独立的， 不存在连锁的现象，表明筛选出来的微卫星位点能够单独利用，并能够提 供有效的遗传信息。 2．通过FIASCO法成功筛选出14个具有高度多态性的黄喉拟水龟微卫星位 点。等位基因数目(NA)从5到15不等。观测杂合度(Ho)和期望杂合 Mmu7，Mmu8，Mmu9，Mmul0和Mmul 件分析得到，这7个位点的无效等位基因频率范围为0．032到0．243。在连 锁不平衡检测当中，所有位点都独立分开，不存在连锁现象。 3．利用8个微卫星标记对7个乌龟养殖群体进行了遗传多样性水平的检测。 结果显示：7个群体中共检测到等位基因130个，各位点等位基因数目(NA) 的遗传多样性丰富。分子变异方差分析(AMOVA)表明，5．91％的分化存 在于群体间，84．29％的分化存在于个体间。虽然乌龟存在着较高的遗传多 样性水平和较低的群体间分化程度，但仍存在着明显的地理变异模式。 UPGMA聚类分析得出湖北荆州(耶JZ)自聚为一支；湖南益阳(H】叽吖)， 北，其余6个群体分布于长江以南，这与他们在地理上分布距离的远近有 着显著的相关性。另一方面，7个群体内部都存在着特有等位基因，提示 群体间等位基因扩散受到一定程度的限制，同时在育种上，可以作为亲本 选育的一个重要参考指标。 关键词： 乌龟；黄喉拟水龟；微卫星；磁珠富集；FIASCO； 遗传多样性；遗传分化 POI，YMORPHICMICROSATELLITELOCIINTWO FRESHWrATERANDGENETIC TURrLES DIVERSITY AMONGCAPTIVEBI迮EDINGSTOCKSOFCHDiESE POND TURTLE(CHINEMYSREEVESII) ABSTRACT ChinesePond reevesii 83 themost Turtle(ChinemysGray,11)is widely distributedisalsoone