久效磷农药对尼罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼生长及GHIGF-I轴的影响研究.pdfVIP

久效磷农药对尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)幼鱼 生长及GH／IGF．I轴的影响研究 摘要 久效磷农药具有很强的神经毒性和内分泌干扰性，其使用及高残留已经造成 严重的水体污染。水体中的久效磷可能会影响鱼类的生长发育、结构、生殖及行 为等多个方面，从而影响鱼类种群甚至整个水生生态系统的健康。然而目前久效 磷农药对鱼类生长的影响研究极为鲜见，急需确定久效磷农药对鱼类生长的影响 效应及其作用机制。为此，本文选用“新吉富”品系尼罗罗非鱼作为实验动物，采 用0．001～1．000 mg·L以久效磷农药暴露罗非鱼幼鱼至21天、42天，测定其标准 体长、体重，并计算其特定生长率，探究了久效磷农药对罗非鱼幼鱼生长的影响 效应。由于硬骨鱼类的生长主要受到生长激素／胰岛素样生长因子．I轴(growth hormone／insulin．1ikefactor-I growth axis，GH／IGF—I axis)的调控，本研究进一步采 用real．timePCR方法检测了久效磷农药暴露对尼罗罗非鱼垂体GH、肝脏GHRl、 达水平及血浆水平的角度初步分析了久效磷农药干扰罗非鱼生长的作用机制，为 科学评估有机磷农药对鱼类的影响提供基础数据。 本文研究结果表明： f1)以0．001、0．010、O。100、1．000 mg·L。1久效磷农药水体半静态暴露尼罗 罗非鱼幼鱼21天、42天，各暴露组罗非鱼标准体长、体重均极显著低于对照组， 其特定生长率也随着久效磷农药暴露浓度的升高而逐渐降低，呈明显的剂量效应 关系，结果表明久效磷农药能够显著抑制尼罗罗非鱼幼鱼的生长。 (2)以0．001、0．010、0．100、1．000mg·L。1久效磷农药暴露尼罗罗非鱼幼鱼 21天，各暴露组垂体GHmRNA水平、血浆GH水平随暴露浓度提高而逐渐升 高，与特定生长率呈负相关关系。结合后面对肝脏IGF．I的检测结果，分析认为 GH不是久效磷农药抑制罗非鱼生长的直接作用靶点，久效磷农药作用下GH基 因表达与合成分泌的升高是肝脏IGF．I的负反馈效应所致。 (3)以0．001、0．010、O．100、1．000mg-L。1久效磷农药暴露尼罗罗非鱼幼鱼 21天、42天，各暴露组罗非鱼肝脏GHR2基因表达水平均受到显著抑制，并呈 现剂量效应关系。低浓度久效磷农药暴露组罗非鱼肝脏GHRl基因表达水平与 对照组无显著差异，较高浓度组基因表达水平受到极显著抑制，因为GH主要通 过与肝细胞表面的GHR2结合，促进肝细胞合成IGF．I，发挥其促生长效应。本 研究发现久效磷农药显著抑制肝脏GHR2基因表达，推测GHR2可能为久效磷 农药抑制罗非鱼生长的作用靶点之一。 (4)以0．001、0．010、O．100、1．000 mg·L。1久效磷农药暴露尼罗罗非鱼幼鱼 21天、42天，肝脏IGF．I基因表达及血浆IGF．I水平逐渐降低，呈剂量效应关系， 并与特定生长率及肝脏GHR2mRNA水平均具有正相关关系。该结果进一步支 持了肝脏GHR2为久效磷农药直接作用靶点的推测：即使在垂体GH水平升高的 状态下，由于其受体GHR2表达被抑制，其介导肝细胞合成IGF．I的作用也受到 抑制，导致血浆IGF．I水平降低，进而导致罗非鱼生长受阻。血浆IGF．I水平的 异常降低引发对垂体GH合成分泌的负反馈调节机制，造成垂体GH基因表达及 合成分泌增加。此外，IGF．I：IGFBP．3比值能够反映血浆中具有生物活性的游离 IGF—I水平，久效磷农药暴露至21天、42天时，该比值随暴露浓度升高而逐渐 降低，表明血浆中游离IGF．I水平降低，这也是导致罗非鱼的生长受抑制的原因 之一。 综上所述，本文研究证明久效磷农药对罗非鱼的生长具有显著抑制效应，并 推测其作用机制如下：罗非鱼肝脏GHR2为久效磷农药的直接作用靶点，久效 磷农药通过抑制罗非鱼肝脏GHR2基因的表达，导致肝细胞表面GHR2水平降 低，其介导GH促进肝细胞合成IGF．I的作用受阻，导致血浆中IGF．I水平降低， 最终造成鱼类生长的减缓；此外，久效磷农药暴露还导致血浆中IGFBP．3水平 降低