何首乌组织培养及其秋水仙素处理生理效应.pdfVIP

何首乌的组织培养及秋水仙素处理的生理效应 摘 要 本文对何首乌组织培养技术进行优化研究，在此基础上使用秋水 仙素处理培养体，研究秋水仙素处理对培养体生理生化指标的影响， 为何首乌组织培养大量繁殖、种质资源保存以及多倍体诱导提供参 考。主要结果如下： 1．不同灭菌时间对外植体(茎尖、茎段)的影响不同。对于茎 段而言，用0．1％的氯化汞消毒7min的消毒效果较好，污染率为仅 16％。对于茎尖而言，用0．1％的氯化汞消毒7min的消毒效果较好， 污染率仅为12％。 2．不同浓度配比的6-BA、NAA对何首乌组培苗叶面积、植株高 2 度、芽的增殖的影响差异不显著。其中，培养基MS+6一BA mg／L+ NAA0．2mg／L较有利于何首乌芽的增殖。 3．不同添加物(椰汁、苹果汁、香蕉泥、活性碳)对何首乌芽 的增殖和生长产生不同的影响。在芽的增殖方面，椰子汁对芽的增殖 有促进作用，增殖倍数达8．7，相反香蕉泥对芽的增殖有抑制作用； 在生长指标方面活性碳表现出比较好的效果，较对照而言，叶片颜色 较深，茎较粗，平均芽长较长。 4．不同外植体类型(带芽茎段、不带芽茎段、叶片)诱导愈伤组 织的难易程度不同。带芽茎段相对比较容易诱导出愈伤组织，诱导率 高达93．75％，不带芽茎段相对较难诱导出愈伤组织，诱导率为75％， 叶片相对而言最不容易诱导出愈伤组织，诱导率仅为59．4％。 5．以茎段为外植体时，诱导愈伤组织的最佳培养基为：MS+ 0．5 0．1 3 2，4一D mg／L+6一BAmg／L+NAArag／L；光照对于愈伤组 织的生长有促进作用，相反活性碳却对何首乌愈伤组织的生长有抑制 作用。 6．不同浓度的6一BA、NAA激素组合对愈伤组织芽分化的影响不 同。分化率最高的培养基为gMS+6一BA1 0．1 mg／L+NAAmg／L， 分化率为13．3％；在此培养基上再添加2，4一D 0．05mg／L则对愈伤组 织芽的分化有抑制作用，分化率仅为6．7％。但是，如果用脱落酸代 替2，4-D，则芽分化被完全抑制。 7．不同浓度秋水仙素处理对何首乌叶片的叶绿素含量、过氧化 活性有不同影响。经过秋水仙素处理24h后，0．1％秋水仙素处理叶 片的叶绿素含量明显低于对照，差异达极显著水平；0．3％秋水仙素 处理叶片的叶绿素含量与对照接近，与0．1％处理之间叶绿素的含量 差异达极显著水平。0．1％秋水仙素处理叶片的CAT酶活性明显低于 对照，差异达极显著水平；但是0．1％和0．3％秋水仙素处理之间CAT 酶活性差异不明显。0．1％和0．3％秋水仙素处理的叶片的POD酶活性 明显低于对照，差异都达极显著水平；但是0．1％和0．3％秋水仙素 处理之间POD酶活性差异不明显。0．1％和0．3％秋水仙素处理叶片的 SOD酶活性与对照差异不明显，SOD酶活性有波动但总趋势是上升的。 8．同一浓度秋水仙素不同处理时间对何首乌的叶绿素含量、过 氧化氢酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物歧化 酶(POD)活性有不同影响。经0．2％秋水仙素处理不同时间后，12h 和24h处理之间的叶片叶绿素含量差异最显著，两者与对照差异均较 显著，其他处理时间之间的叶绿素含量与对照差异不明显；各时间处 理的叶片CAT酶活性均明显低于对照，与对照差异达极显著水平。其 36h、48h处理的之间的CAT酶活性差异不明显。各时间处理叶片的 POD酶活性与对照差异不明显，不同处理时间之间的POD酶活性差异 也不明显；各时间处理的叶片的SOD酶活性与对照的差异不明显，不 同处理时间之间的SOD酶活性差异也不明显。 9．移栽炼苗时先在珍珠岩过渡后移栽至黄心土的效果较好。何 首乌在珍珠岩作为移栽基质时移栽成活率为33％；黄心土作为移栽基