《人脐血清对人脐带血间充质干细胞生物学特征与衰老的影响》.pdf

．． ．— — 582 ．．．—— 重庆医科大学学报 2014年第39卷第5期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2014．Vo1．39No．5) DOI：10．13406~．cnki．cyxb．000080 人脐血清对人脐带血问充质干细胞生物学特征与衰老的影响 王 爽，范振海，刘祖林，王钰莹，方 宁，喻皇飞，刘金伟，余丽梅 (遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，遵义 563003) 摘【 要】目的：探讨人脐血清(humanumbilicalcordbloodseFum，CBS)对体外培养人脐血间充质干细胞 (humanumbilicalcord bloodmesenchymalstemcells，hUCB—MSCs)基本生物学特征的影响。方法：密度梯度离心分离脐带血单个核细胞。以含3％CBS 加7％胎牛血清 (~talbovinesernm，FBS)(CBS组)或 10％FBS(FBS组)的完全培养基培养 hUCB—MSCs，流式细胞术检测细胞表 面分子与细胞周期，显微镜下测定细胞表面积和表达p一半乳糖苷酶细胞百分率，MTr法检测光密度值、绘制生长曲线。结果： CBS组和FBS组均表达CD44、CD105、CD90、CD73，不表达 CD45、CD34、CD1lb、CD19和人白细胞 DR抗原 (humanleukocyte antigenDR，HLA—DR)，但与FBS组比较 ，CBS组表达 CD90细胞百分率更低，G0／G1期细胞比例较少，细胞增殖指数较高 (P 0．05)且细胞表面积也明显更小(PO．05)。CBS组生长曲线较FBS组左移，峰值更高，细胞倍增时间48．37h，FBS组则为54．43h。 FBS组 B—gal染色阳性细胞百分率明显高于CBS组(P(0．05)。结论：部分CBS合用 FBS培养hUCB—MSCs能更好地促进细胞增 殖，并更好地保持hUCB—MSCs的基本生物学特征和延缓细胞的衰老。 【关键词】人脐血清；脐带血间充质干细胞；生物学特征；衰老 【中图分类号|Q813．1 文【献标志码】A 【收稿 日期】2013—04—02 作者介绍 ：王 爽，Email：wangshuangl16@163．com， 研究方向：干细胞生物学与衰老。 通信作者 ：余丽梅，Email：ylm720@sina．corn。 基金项 目：国家 自然科学基金资助项 目(编号、遵义市重 大科技项目培养与科技人才培养计划资助项目f编号：遵科 培 (2009)02号1。 优先出版：httpJw／ww．cnki．netk／cms／doi／10．13406／j．cnki．cyxb．000080．html 9【】 GaurT，LengnerCJ，HovhannisyanH，eta1．CanonicalWNTsignaling 【18】 RossiniM，GattiD，AdamiS．InvolvementofWNTb／eta-catenin promotesosteogenesisbydireetlstimulatingRunx2geneexpression[J]．J Singalinginthetreatmentofosteoporosis[J]．CaleifTissueInt，2013，93 BiolChem，2005，280(39)：33132—33140． (2)：121-132． [10] TetsuO，McCormickF．Beta—cateninregulatesexpressionofcyclin 【19】 PedersonL，RuanM，WestendorfJJ，eta1．Reuglationofbonef0p D1incoloncarcinomacells[J]．Nature，1999，398(6726)：422-426． marionbyosteoclastsinvolvesWnt／BMP signalingandthechemokines [11] LiJ，SarosiI，CattleyRC，eta1．Dkk1-mediatedinhib