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厚荚相思的组织养与农杆菌介导遗传转化体系建立的研究
厚荚相思的组织培养与农杆菌介导
遗传转化体系建立的研究
摘要
本论文研究主要是通过对厚荚相思进行系统的组织培养试验，建立起
良好的厚荚相思组织培养体系，并结合农杆菌介导遗传转化建立遗传转化
体系，成功的获得了厚荚相思GUS基因转化植株，并进行了检测，为今后
的厚荚相思组织培养与遗传转化研究提供重要的参考依据。试验结果表明：
1、厚荚相思种子灭菌后在不添加任何激素的改良1／2MS培养基中培养
效果最好，而其组织培养的基本培养基以改良MS培养基效果最佳。
思种子灭菌效果最好，菌污染率为0，发芽率达89％；单独使用次氯酸钠
对厚荚相思种子进行消毒灭菌，灭菌不彻底。
3、不定芽的直接分化途径可作为厚荚相思组织培养的主要途径；脱分
化产生的厚荚相思愈伤组织分化频率低，不利于厚荚相思组织培养。
4、2，4。D和KT不适用于厚荚相思诱导愈伤组织和不定芽以及进行组
织快繁生产有效苗。6-BA对诱导愈伤组织和不定芽有促进作用。最佳诱导
到4．03倍。
5、添加10mg／L的椰子汁对不定芽的诱导有一定促进作用。
6、30天苗龄的子叶是厚荚相思种子组培快繁的最佳外植体苗龄。
7、以20天，代为继代周期有利于不定芽和有效苗的增殖。
8、厚荚相思无菌苗子叶的不定芽增殖能力强且持久，持续继代8次以
上。
9、厚荚相思组培苗的生根壮苗培养以改良MS+Meto
5-1．5。乩效果较好。
At05、At06的生长，且保持较高的外植体分化率。
体在含Km的培养基中难以分化出根。
12、厚荚相思浸染后不需要预培养，可以直接分化，GUS基因的瞬时
表达效果最好，瞬时表达率为10％。
培养3d，GUS瞬时表达效果最佳，瞬时表达率为26．7％。
14、GUS基因能在厚荚相思完整植株中稳定表达，已获得厚荚相思GUS
基因转化植株。
关键词：厚荚相思组织培养愈伤组织不定芽农杆菌介导遗传转
化GUS基因
TlSSUE ANDGENETlC
STUDlESON CULTURE
1 0N
TRANSFORMAT0FACAO／月ORASSICARPA
ABSTRACT
this studiedtissue
In cultureofAcacia
paper,we crassicarpasystematically．The
system
cultureand
oftissue transformationofAcacia was
agrobacterium—mediated crassicarpa
establishedandsomeGUS ofAcacia hadbeen
transgene obtained
planflets crassicarpa
resultswereincludedinthe
successfully．The following：
1、AmendI／2MSmediumwimom suitabletosterilite
hormoneswas
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