灵武长枣中多糖提取分离技术研究.pdfVIP

摘要 枣（Zizipihus Jujube Mlill ）为鼠李科枣属植物，是我国传统医药中“药食同源”的优 良补品，具有镇静、安神、补血、健脑、抗癌、增强免疫力等功效。灵武长枣（Lingwu chang jujube ）原产于宁夏灵武市，为当地的主要栽培品种，有极高的营养价值和很好的医疗保 健作用。我国在枣多糖方面的研究还处在起步阶段，灵武长枣多糖的研究还未见报道。为 了明确灵武长枣中多糖类有效成分，探讨其作用机制，以利于今后灵武长枣的合理开发和 利用，本论文对灵武长枣中多糖的提取、纯化、分级、分子量测定及初步结构鉴定等方面 进行了较为系统的研究。研究结果如下： （1）采用热水浸提法提取灵武长枣中水溶性多糖，研究了在提取次数都为两次的情况下液 料比、浸提时间、浸提温度对长枣多糖得率的影响。在单因素试验基础上，以这三个因素为基础 设定五个水平，把粗多糖得率作为响应值，应用中心组合试验建立数学模型，进行响应面分析。 结果表明：长枣多糖的最佳水提条件参数为：液料比 1:11，在 90℃下提取 5h，实验验证该条件 下长枣多糖得率达到 8.02%。通过方差分析证明，响应面分析法建立的数学模型显著性高，较已 有的长枣多糖提取工艺法具有成本低，操作简便，试验周期短，能获得较高多糖提取率等优点。 （2 ）在脱蛋白的过程中，通过前期的试验和综合比较，排除了常用的氯仿-正丁醇（Sevage） 法，主要对三氯乙酸（TCA ）法进行研究。选取三氯乙酸的浓度、除蛋白的次数、反应时间三个 因素进行单因素试验和中心组合试验。由响应面和回归方程分析得出三氯乙酸法除长枣粗多 糖中蛋白的最佳工艺条件为三氯乙酸浓度 14%，重复除蛋白三次，反应时间为 8 小时。并 且实验证明，蛋白去除率达到 96% 以上。 （3 ）用纤维素DEAE-52 层析柱对脱蛋白、脱色、脱盐的长枣多糖进行分级。洗脱得到 6 个 组分的多糖样品（Ju-0 、Ju-1 、Ju-2 、Ju-3 、Ju-4 、Ju-5 ）。并用琼脂糖 Sepharose-4B 凝胶柱分 别纯化过滤了 6 个多糖样品。用紫外吸收光谱鉴定其纯度，表明 6 个多糖样品不含蛋白质和核 酸。 （4 ）采用粘度法结合经验计算公式公式测定 6 个多糖样品的相对分子质量。结果为长枣多 5 4 5 4 糖 Ju-0 、 Ju-1 、Ju-2 、Ju-3 、Ju-4 、Ju-5 的分子量分别为 1.24×10 、7.61×10 、1.02×10 、9.50×10 、 5 5 1.33×10 、1.60×10 。用红外光谱法鉴定 6 个多糖的初步结构，证明 6 种多糖样品为β-D-吡喃 多糖。 关键词：灵武长枣，水提取，分离纯化，分子量，红外光谱 I Abstract Chinese jujube (Ziziphus jujube Mill) belonging to the genus Ziziphus Mill, is used as an invigorant in traditional Chinese medicines and Chinese foods. It has activities of sedation, nourishing blood, healthy brain, anti-tumor effect, promoting immunity, etc. Lingwu chang jujube is originally produced in Lingwu city Ningxia province, cultivated as the main varieties. It has high nutritious value and excellent pharmaceutical function. However the research work on polysaccharide from j