扶正消瘤颗粒抗MCF-7耐药细胞体外增殖及机理研究.pdf

7 f蜊删『『f『『舢俐删册『f『f『ff『『肺 Y1 997380 扶正消瘤颗粒抗MCF-7耐药细胞体外增殖 及机理研究 硕士研究生：张瑞清 指导教师：张仲海教授杨赶梅教授 摘要 背景目的 乳腺癌为严重危害全球女性健康的恶性肿瘤，全球每年约有100万妇女患 乳腺癌，约有40万人死于该病，其发病率逐年上升，且年龄趋于年轻化。发达 国家为乳腺癌高发区，我国虽属乳腺癌低发地区，但发病率仍居女性恶性肿瘤首 位。21世纪，我国乳腺癌发病率城市高于农村，经济发达地区的发病率更高。 手术、放疗、化疗、内分泌、生物治疗及中医中药治疗为当今乳腺癌的主要治疗 方法，化疗在其中占重要地位，而乳腺癌细胞对化疗药物耐药已为乳腺癌治疗不 能取得治愈性疗效的最主要原因。近10年来，许多学者致力于乳腺癌的多药耐 药性研究，发现乳腺癌多药耐药基因(MDRl)及其编码的糖蛋白(P—gp)是引起乳 腺癌耐药的主要原因。 因此，寻找耐药逆转剂、增强化疗疗效是肿瘤化疗急需解决的重大课题。 大量逆转肿瘤耐药的研究发现钙通道阻滞剂、免疫调节剂、钙调蛋白拮抗剂等 药具有逆转耐药活性，但因疗效欠佳、作用靶点单一、毒副作用大等缺点难以 应用于临床。中药复方因疗效确切、多靶点、毒副作用小等优点，具有很大的 研究价值。从中药复方中寻找安全有效的耐药逆转剂逐渐成为当今研究热点。 中药复方体外药理研究的发展，复方中药含药血清理论的提出为深入研究 复方中药抗肿瘤机制开辟了新的出路。血清药理学是指将中药或中药复方经口 给动物灌服一定时间后采集动物血液、分离血清，用含有药物成分的血清进行 体外实验的一种半体内实验方法。该方法主要有两个特点：一是克服了用中药制 剂直接进行体外实验时，中药制剂本身的理化性质对实验的干扰；二是实验结 果与在体实验有较好的一致性，不仅能反映中药母体药物及其可能的代谢产物 摘要 的药理作用，而且还能反映可能药物诱导机体内源性成分所产生的作用，为从 细胞分子水平研究中药药理学作用提供了新的手段。 中医学认为，乳腺癌属“乳岩范畴，多表现为虚实夹杂证，表现为气、血、 阴、阳不足，以及痰浊、瘀血、热毒夹杂作用的结果。恶性肿瘤本为正气虚损、 阴阳失衡、脏腑功能失调所致，手术、放疗、化疗进一步损耗气血，正气受创。 遂治疗上宜扶正培本，去除邪毒，改善机体内环境，减轻放化疗毒副反应及手 术对机体免疫功能的抑制，调补先后天之本，调动和增强机体自身抗癌能力。 大量研究证实许多中药及复方具抗肿瘤活性，不仅能提高机体免疫功能，还能 抑制癌细胞的分裂，改善症状，提高患者的生存质量，延长生存期。 针对乳腺癌本虚标实的病机，导师结合多年临床经验，拟制中药复方扶正消 瘤颗粒，功以益气养阴扶正，解毒散结、祛瘀化痰消瘤，对乳腺癌术后放化疗增 效、减轻并发症、增强免疫力，延缓肿瘤转移具有较好的疗效。方中以西洋参、 灵芝、百合、黄芪益气养阴，清热生津；增强患者脾胃运化功能，补益中气；薏 苡仁、猪苓、法半夏、陈皮化痰祛湿浊，助脾胃运化；三棱、莪术活血祛瘀，使 瘀血去则新血生，即祛瘀生新之功；半枝莲、白花蛇舌草、山慈菇、黄药子解毒 散结消瘤，清除余毒；诸药共用，益气健脾养阴，扶正固本，化痰祛瘀，解毒消 瘤而达到增强免疫、减毒增效的作用。 本实验通过研究扶正消瘤颗粒含药血清对乳腺癌细胞MCF-7耐药细胞体外 增殖及机理的研究，为深入研究扶正消瘤颗粒临床疗效的作用机制奠定基础。 方法 1、采用浓度梯度试验诱导法，应用联合化疗药物(紫杉醇和表柔比星的最 基本性状、细胞生长曲线及MCF-7对联合化疗药物的最大耐药浓度； 2、采用动物实验常用的等效剂量折算系数公式，折算大鼠每日给药量。将 扶正消瘤颗粒剂用温水配制成三种不同的倍数浓度即l倍量、2倍量、3倍量， ¨