MiR-194在胃癌组织中的表达及其与临床病理资料的关系.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………．．1 英文论著摘要……………………………………………………………………．．4 二、英文缩略语………………………………………………………………………。9 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………10目U舌…………………………………………………………………………………………………………l() 材料与方法………………………………………………………………………．1O 实验结果…………………………………………………………………………16 讨论…………………………………………………………………………………………………………25 结论…………………………………………………………………………………………………………28 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………．．30 五、参考文献…………………………………………………………………………31 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………34 在学期间科研成绩………………………………………………………………44 致谢…………………………………………………………………………………………………………45 个人简介…………………………………………………………………………．46 ·中文论著摘要· MiR-194在胃癌组织中的表达及其与临床病理资料的 关系 目 的 核苷酸构成，其表达具有组织特异性和时序特异性。1993年，Lee首次在秀丽隐干 线虫(Caenorhabdifis 的3’．非翻译区互补结合，在转录后水平上抑制靶基因的表达。迄今．已发现了数 百种miRNA。miRNA参与了生命过程中一系列的重要过程包括早期发育、细胞 增殖、分化、凋亡、死亡，脂肪代谢。研究表明，MicroRNAs与肿瘤的发生和发 展有着密切的联系，若干miRNA直接参与消化器官(包括肝、结肠、胰腺、胃、 胆管)肿瘤的发生和发展。并与病理分级、临床分期、耐药性、诊断、治疗和预 后等密切相关。 目前，围绕胃癌的miRNA的研究已经展开并不断深入。很多应用芯片技术和 生物信息学方法的研究已经发现了一些与胃癌密切相关的miRNAs。研究显示， 92％的胃癌样本中，miR．21呈显著的高表达，提示miR-21可能作为有效的胃癌诊 断标志。Motoyama A2)呈负相关，而HMGA2在胃癌中高表达状态，且与肿瘤的侵袭能力及 group 患者的预后正相关，因此，let．7可能是通过负性调控HMGA2来发挥其在胃癌中 的作用。其他的相关研究证实，人工miRNA可能抑制癌细胞肿瘤相关的基因表达， 从而影响肿瘤细胞的生物学行为。 本实验研究中，经参考国内外相关文献确定miR-194为我们研究的重点。利 用定量real．timePCR技术检测了胃癌组织相对于癌远端非癌组织中miR．194的表 达，并分析miR．194表达水平与临床病理资料(性别、年龄、癌灶大小、病变位 置、大体分型、组织学分级、pT分期、pTNM分期及淋巴管转移等临床病理资料) 问的联系，初步探索其在胃癌的发生、发展中发挥的作用。 方 法 一、MiR-194在胃癌组织中的表达 本实验收集了119例临床病人的胃癌及周围非癌组织，经提取总RNA，加尾， 抽提、纯化，反转录后得到eDNA模板，运用定量real．timePCR检测miR．194在 胃癌组织中相对于癌旁非癌组织的表达量。实验以U6基因的表达为内参计算 miR．194的相对表达量。U6为管家基因，它的表达量相对于其他基因的表达是相 对恒定的。然后使用2‘心玎公式的方法计算出miR．194在癌组织相对于癌旁非癌 组织表达量。如果相对表达量小于1，则被认为是低表达。反之，被认为是高表 达。然后，运用统计学方法分析miR．194与临床病理资料之间是否存在相关性。 二、MiR．194在胃癌细胞系中的表达 BGC．823，并提取三种细胞的总RNA，并最终得到eDNA。在胃癌癌旁非癌组织 中随机选取了7例非癌组织做为阴性对照，运用Real．