YB-1+RNAi对肺腺癌细胞A549中MACC1基因表达影响的研究.pdfVIP

YB-1 RNA i对肺腺癌细胞A549中MACCl 基因表达影响的研究 硕士生姓名：尧然 指导教师：顾春东教授 专业名称：胸外科学 摘要 目的：近年来，肺腺癌的发病率明显上升，已占非小细胞肺癌(NSCLC)的 40％以上，以肿瘤早期即易发生远处转移为特点，临床处理上极为棘手。结肠癌 in 转移相关基因1(Metastasis．AssociatedColonCancer 1，MACCI)是最近发现的 一种新基因，与肿瘤增殖及早期转移的密切相关，并成为近年肿瘤转移研究领域 最具影响力的发现之一。人类YB．1蛋白(Y box．binding protein．1，YB．1)是一类 特异性结合目的基因启动子和增强子内部Y-box序列的重要的核转录因子，在 MACCI基因序列中，其启动子含有数个Y．box序列。因此，对人类YB．1蛋白及 其相关功能的研究，可能会部分揭示MACCl表达的调控机制。 本实验在前期研究的基础上，在肺腺癌A549细胞株中，利用脂质体转染及 RNA干扰技术，抑制YB．1蛋白的表达，检测转染前后MACCI基因的表达变化， 从而初步证实YB．1蛋白是否对MACCI基因的表达具有调控作用。 Cruz公司设计合成的YB．1 方法：利用脂质体Lipofectamine2000将Santa siRNA片段转入肺腺癌A549细胞株中，并以ControlsiRNA转染组、空白转染组 及正常培养组为对照。通过RT．PCR与WesternBlot法分别检测各组转染前后YB．1 与MACCI在基因及蛋白水平表达的变化。 采用SPSSl7．0统计学软件对以上实验数据进行分析，实验组与对照组实验皆 重复3次，量化资料用均数标准差(X士S)表示，各实验组间利用单因素方差分 析检验其差异是否具有显著性(PO．05)。 结果： YB．1 2．Western Blot检测结果显示，肺腺癌A549细胞中YB．1蛋白的表达量经 YB．1 结论：通过RT-PCR与Western Blot检测方法分别在基因及蛋白水平初步证 实在肺腺癌A549细胞中YB．1蛋白对MACCl基因的表达具有调控作用。 MACCI 关键词：肺腺癌YB．1 转染 YB-·1 viaRNAion Effectof downregulation MACCl inhuman geneexpression lung A549 adenocarcinomacellline Master candidate：YaoRan degree Gu Supervisor：ProfessorChundong or：Thoracic Maj surgery Abstract