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苹果乙烯响应转因子mdeils的克隆及其功能鉴定
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符号说明
目录
中文摘要………………………………………………………………………………………I
英文摘要………………………………………………………………………………………II
1前言…………………………………………．…………………………………………………………………………．．1
1。1植物激素乙烯……………………………………………………………………………1
1．1．1乙烯的感知和乙烯信号………………………………………………………………．2
1．1．2乙烯的不同响应………………………………………………………………………。3
1．1．3乙烯与发育……………………………………………………………………………。4
1．1．4乙烯与植物免疫………………………………………………………………………，．5
1．1．4．1植物防御信号中的激素……………………………………………………………．．6
1．1．4．2防御信号途径中乙烯介导的信号交叉……………………………………………．．6
1．2植物EIN3转录因子……………………………………………………………………．．8
1．2．1植物中EIN3转录因子的结构特征…………………………………………………一8
1．2．2植物中EIN3转录因子的功能………………………………………………………10
1．2．3植物中EIN3转录因子的生物化学调控……………………………………………10
1．2．4植物中EIN3转录因子响应的乙烯信号…。j………………………………………．12
1．3本研究的目的和意义……………………………………………………………………13
2材料和方法………………………………………………………………………………．14
2．1实验材料…………………………………………………………………………………14
2．1．1植物材料………………………………………………………………………………14
2．1。2植物材料的培养及处理………………………………………………………………14
2．1．3菌株及载体……………………………………………………………………………14
2．1。4试剂盒、生化试剂、酶、培养基……………………………………………………．14
2．1．5仪器与设备……………………………………………………………………………16
2．1．6
PCR引物…………，：……………………………………………………………………………………………16
7
2．2实验方法………………………………………………………………………………．．1
2．2．1植物总RNA的提取与检测…………………………………………………………17
2．2．1．1 7
Trizol法提取植物RNA……………………………………………………………．1
8
2。2．1，2CTAB法提取植物总RNA…………………………………………………………1
2．2．1．3总RNA含量与纯度检测…………………………………………………………．19
2．2．1．5反转录eDNA第一链的合成………………………………………………………19
2．2．1．6反转录产物质量检测………………………………………………………………20
2．2．2植物基因组DNA的提取与纯化………………………………………………．．上…20
2．2．2．1植物基因组DNA的提取…………………………………………………………．20
2．2．2．2植物基因组DNA的纯化…………………………………………………………．21
2．2．2-3基因组DNA含量与纯度检测……………………………………………………．21
2．2．3基因克隆………………………………
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