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葡萄多糖的分离化、结构与功能特性的研究

摘 要 近年来,发现了一些有临床价值的多糖及其衍生物类生化药物。陆续报道了有 关活性多糖的提取、分离、鉴定的实验方法和研究成果。大量的药理及临床研究己 表明:多糖类化台物是…利j对正常细胞无毒副作用,能够激活免疫细胞、提高机体 免疫功能的免疫调节剂,并且具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂等多种生物活 性,越来越引起人们的极大重视,对多糖化合物的研究有了长足的进展。因此,寻 找高效天然无毒副作用的多糖是保健食品功能因子的研究项目的重要开展领域之 有关葡萄多糖的研究尚未见过任何报道。葡萄是新疆维吾尔自治区的特产。本 研究以新疆葡萄干为原料,利用现代的分离纯化和分析技术,对葡萄多糖(阳船Linn 了深入系统的研究。在此基础上,迸一步对葡萄多糖粗品与各级分提高免疫功能、 抗肿瘤、降血糖等活性功能进行了评价。为今后葡萄多糖的更深入研究与开发奠定 了基础。 / …/l、通过对葡萄多糖分离纯化的系统研究发现,葡萄干经水提醇沉,氯仿脱脂、 Sevag法除蛋白,透析、冷、廉干燥后,粗葡萄多糖的得率为8.68%。粗葡萄多糖经 Sephadex G--200、聚丙烯酰 A--25柱层析得四仑级分的多糖,经纸层析、Sephadex 胺凝胶电泳等方法鉴定和理化分析表明这四个级分的葡萄多糖均为均一多糖;不含 游离糖、蛋白质、淀粉等物质。以粗多糖为起始原料计算,四个级分的纯品多糖得 为10,41%。 根据气相色谱分析表明,四个级分的多糖都含有不同量的阿拉伯糖、半乳糖、 葡萄糖、甘露糖,VLP一2、VLP一3还含有鼠李糖和木糖。多糖构型中可能有13一 D一吡哺葡萄糖。 VLP一1、VLP一2葡萄多糖富含苯丙氨酸、天冬氨酸、精氨酸、苏氨酸等氨基酸。 有不周量的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖和木糖,红外光谱图谱的 分析结果证实了n、8两种苷型均存在。 2、葡萄多糖的免疫功能研究 免疫是机体产生的一种保护性生理反应,是机体具有的列自我和异己抗原的认 识或应答能力。免疫系统的存在及其功能的正常化是机体免疫功能稳定的基本保证。 免疫调节功能是植物活性多糖最重要的功能,它与多糖的抗肿瘤、抗氧化、降血糖、 降血脂等功能紧密相关。多糖的免疫调节功能实际上就是多糖作为抗原引起机体的 免疫应答。实验结果显示: 多糖各剂量组对正常小鼠的淋巴细胞转化有明显的促进作用其中VLP一1在 10()mg/kg·d剂量下作用最好,淋巴细胞转化率高达69.5013%。 各vLP一1剂量对正常小鼠免疫器官的增重均有明显作用,其中V乙P一1在50 mg/姆-d mg,kg·d、100mg/kg·d剂量下对胸腺、脾脏有极显著地增重作用,在25 mg/蚝·d 剂蹙下极显著地增加胸腺重量,而对脾脏增重无影响:粗多糖仅在100 剂量下对脾脏增重有明显作用外,其余各剂量对正常小鼠胸腺、脾脏增重无影响。 葡萄多糖对DNCB诱导的迟发型超敏反应(DTH)有显著的促进作用,其中粗 mg/蝇·d:各剂量对免疫 多糖在50mg/蚝·d剂量下效果最明显,其次为剂量25 器官均有显著的增重作用。葡萄多糖可以显著促进巨噬细胞的吞噬作用。由此可见, 葡萄多糖能全面增强机体的细胞免疫和体液免疫功能、增加免疫器官重量。 3、葡萄多糖抗肿瘤研究 肿瘤研究的根本目的是降低死亡率及发病率,降低死亡率主要靠治疗,降低发 病率主要靠预防。肿瘤的发生和机体的免疫状态密切相关,免疫功能缺陷或低下易 诱发肿瘤。反之,通过刺激机体的免疫系统(如淋巴系统、免疫器官等),使机体的 免疫功能得到恢复和提高,由机体本身的抵抗力间接去杀死肿瘤细胞。 对葡萄多糖抗肿瘤功能的实验研究中发现: 葡萄多糖个剂量组对荷瘤小鼠体重变化无明显影响。葡萄多糖各剂量组与对照 组比较表明对S180实体瘤有一定的抑制作用,其中从瘤重、抑瘤率、瘤体比等几项 指标综合反映,VLP一1(100mg/k·d)、粗多糖(50mg

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