ibv与ibd二联核酸疫苗构建及与鸡il-18共同免疫效力研究.pdfVIP

摘要 摘要 S1、IBDV S1、IBDV 本研究首先对IBV VP2基因进行亚克隆，并利用一段linker将IBV VP2基因连接后，利用真核表达载体pVAX．1，通过基冈重组分别构建真核重组表达质粒 S1．1inker-IBDVVP2。体外瞬时转染实验表明， pVAX．IBVS1、pVAX．IBDVVP2和pVAX．IBV 外源基因能够在细胞内进行表达，并且表达后的蛋白可以被相应的mVSl多克隆抗体和 IBDV VP2多克隆抗体识别，说明了插入的外源基因具备各自的免疫反应性，为动物体内试 验提供了基础。 S1真核重组质粒)、VP2组(免疫 将试验鸡分为8组，即S1组(免疫pVAX．IBV SVl8组(免疫pVAX．IBV PBS)、pVAX组(免疫pVAX空载体质粒)。免疫过程中利用淋巴细胞增殖试验、酶联免疫 吸附试验、中和抗体试验以及利片j流式细胞术检测CD4+、CD8+T淋巴细胞动态变化，对不 同日龄的试验动物进行检测，最后用病毒攻击试验比较免疫不同质粒组别之间保护率。 实验结果表明，二联核酸疫苗对两种病毒的攻击有一定的保护作用，添加了ChIL-18作 为免疫佐剂增强了二联核酸疫苗的免疫效果，同时增加了核酸疫苗对病毒攻击的保护力。 关键词核酸疫苗、鸡传染性支气管炎、鸡传染性法氏囊、鸡白介素18 Abstract of AcidVaccines ConstructionBivalentNucleic Against Effect IBandIBDandImmune ofChicken Adjuvant in IL．18ontheVaccinesChicken Abstract Inthis VP2weresubclonedinto S1，IBDV eukaryoticexpressionvector, study,IBV followedfused inthesamevectortoconstructthreerecombinant respectivelyby expression namedr Sl VP2and Sl-linkerIIBDVVP2． plasmids pVAX-IBVpVAX-IBDVpVAX-IBV Transienttransfectionofthesethreefusion vitroshowedthatthe couldbe plasmids／n genes inBHKcellsandcouldbe anti—IBVmonoclonaland specific expressed recognizedbY antibody anti—IBDV results theusefulmaterialsfor polyclonalan