水牛分离精子体受精初步研究.pdfVIP

水牛分离精子体外受精初步研究 摘要 本研究的目的是探讨用流式细胞仪分离水牛精子体外受精(1VF) 的可行性，建立水牛分离精子IVF的系统。抽取来自屠宰场水牛卵巢 表面直径为2～6mm卵泡的卵母细胞，在体外成熟培养后与流式细胞 仪分离的水牛精子进行lVF，受精后8～10h将假定受精的卵子移入 颗粒细胞单层进行培养，受精后2d检查分裂率，6～9d检查囊胚发 育率，1～2级囊胚直接用于移植或者冷冻保存。结果发现：分离精 lVF后第6、7、8d所占的囊胚百分比差异不显著(PO．05)：用分离 的X和Y精子进行lVF生产的雌性胚胎和雄性胚胎在受精后第6、7、 8d囊胚所占的比例差异不显著(PO．05)；精子分离后在4。C下保存： (1)15—18(2)39--42和(3)69—72h然后进行IvF，其分裂率分别 和11．29％，前两组之间的分裂率和囊胚率差异均不显著(PO．05)． 但与第三组的分裂率和囊胚率差异均极显著(PO．01)；分离和未分 离精子生产胚胎冷冻一解冻后的存活率分别为70．93％和73．2％，差 异不显著(PO．05)。以上的结果表明：(1)分离的水牛精子可以成 功应用干lvF的体系生产出性别控制胚胎；(2)精子分离并没有造成 囊胚发育的迟缓；(3)用分离x和Y精子进行IVF所生产的雌性胚胎 h 和雄性胚胎的发育是趋于同步的；(4)精子分离后保存在4。C下42 内用于体外受精仍可获得正常的分裂率和囊胚率；(5)分离精子IvF 生产胚胎可冷冻保存；(6)用水牛分离精子IvF生产的胚胎移植给受 体母牛可成功获得妊娠。 关键词：水牛IVFxY精子胚胎性别控制流式细胞仪 FERTlLIZATl0N STUDYONINVITRO PRELIMINARY SPERM Wl THSORTEDBUFFALO ABSTRACT The ofthe wastotestthe of studies objective present feasibility sortedbuffalo usedinIVF andtoestablish flow·cytometricallysperm systems IVF for were from2～6 suitable sortedbuffalo systems sperm。Oocytesaspirated mmfoIliclesonthebuffaloovariesfrom andmaturedinvitro． slaughterhouse After werefertilizedwithsorted for8～10handthen maturation．oocytes sperm the wereculturedwith and zygotes presumptive granulosecells．Cleavage rates inseminationwererecordedonD2andD6～D9after blastocyst