甘蓝型油菜新型细胞质雄性不育系NCa不育胞质类型的分子鉴定.pdfVIP

中国农业科学 2005,38(10):1965-1972 Scientia Agricultura Sinica 甘蓝型油菜新型细胞质雄性不育系 NCa 不育胞质 类型的分子鉴定 危文亮，王汉中，刘贵华 （中国农业科学院油料作物研究所/ 国家油料作物改良中心/农业部油料作物遗传改良重点实验室，武汉 430062 ） 摘要：以4个限制性内切酶（Eco RI、Bam HI、HindIII、PstI）进行酶切、14个线粒体基因为探针，对 NCa 和 pol、nap、ogura、tour 等 5 个甘蓝型油菜细胞质雄性不育系的不育胞质线粒体 DNA 进行 RFLP 分析。在总计 54个有效探针/酶组合中，除12个组合在5种不育细胞质间没有检测到差异外，其余42 个探针/酶组合在5个不 育系中均检测到差异。其中， atp1/EcoRI、atp1/HindIII、atp6/Eco RI、atp8/Bam HI、orf139/ Bam HI 等 5 个 探针/酶组合在 5 个不育系的不育胞质间检测到各不相同的条带，从而可以将它们两两完全区分开。RFLP 分析结 果从分子水平上进一步证明了 NCa 不育系确实具有与 pol、nap、ogura、tour 等不育系不同的的不育胞质，是一 类新的不育胞质类型。这5个探针/酶组合也可以作为鉴定甘蓝型油菜不育细胞质的分子标记。根据控制 pol、nap、 ogura 等不育系的线粒体基因序列和拟南芥线粒体基因组序列设计了22 对引物，对上述5种甘蓝型油菜不育系的 线粒体DNA进行了 PCR分析，没有找到可以将 NCa 不育胞质与其它类型不育胞质明显区分开来的引物。 关键词：甘蓝型油菜（Brassica napus L.）；细胞质雄性不育；不育胞质类型；PCR；RFLP Molecular Identification of the Sterile Cytoplasm of NCa of a Cytoplasmic Male Sterile Line in Rapeseed ( Brassica napus L.) WEI Wen-liang, WANG Han-zhong, LIU Gui-hua ( The Oil Crops Research Institute, Chinese Academy of Agriculture Sciences / National Center for Oil Crops Improvement / The Key Laboratory for Genetics and Improvement of Oil Crops, Ministry of Agriculture, Wuhan 430062 ) Abstact: Previous research on the NCa, a cytoplasmic male sterile (CMS) line in Brassica napus, showed that it might hold a new type of sterile cytoplasm. RFLP analysis of the mitochondrial (mt) DNA of the 5 CMS lines, i.e., NCa, pol, nap, ogura and tour CMS, combining 14 probes originated from mt genes with 4 endonuclease, such as EcoR I, BamH I, Hind III and Pst I, was performed and detected that 42 combinations of probe/enzyme out of the total 54 combinations could discover the different bands among