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中国农业科学 2013,46(16):3488-3495
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.020
高效液相体积排阻色谱法测定稻米支链淀粉链长的
相对分子质量分布
1,2 1 1 1 1 1
杨小雨 ，刘正辉 ，李刚华 ，王强盛 ，王绍华 ，丁艳锋
1 2
（南京农业大学农学院/农业部作物生理生态与生产管理重点实验室，南京 210095 ； 贵州省亚热带作物研究所，贵州兴义 562400 ）
摘要：【目的】建立稻米支链淀粉链长相对分子质量分布的高效液相体积排阻色谱法（high performance size
exclusion chromatography, HPSEC）的测定方法。【方法】先采用丁醇沉降法分离提纯稻米支链淀粉，纯化后的
支链淀粉经异淀粉酶酶解切开分支糖苷键，然后运用HPSEC 测定其相对分子质量分布。建立了稻米支链淀粉链长
相对分子质量分布的HPSEC 分析方法：Shodex SB-G、Shodex SB-803 （1 000—100 000）、Shodex SB-802.5 （300
-1 -1 -1
—10 000）3 根凝胶色谱柱串连，柱温40℃；流动相为0.1 mol·L Tris+0.1 mol·L NaCl，pH=7.40，流速0.5 mL·min ；
采用示差折光检测器（Differential refractive index detector, RI），检测器温度为37℃；待测样品浓度为5
-1
mg·mL ，进样量20 μL。【结果】本法提纯的稻米支链淀粉：淀粉含量为99.4%、蛋白残余为0.02%、支链淀粉碘
复合物最大吸收峰为517 nm，为高纯度支链淀粉。供试大米样品脱分支支链淀粉的平均聚合度（DP）分布在2—
120，无杂峰干扰。【结论】试验结果和方法验证表明本方法数据可靠、重复性好、简单易行。
关键词：稻米支链淀粉；相对分子质量分布；高效液相体积排阻色谱
Determination of Rice Amylopectin Chain-Length Distribution by
Using High Performance Size Exclusion Chromatography
1, 2 1 1 1 1 1
YANG Xiao-yu , LIU Zheng-hui , LI Gang-hua , WANG Qiang-sheng , WANG Shao-hua , DING Yan-feng
1
( Agronomy Colleg e of Nanjing Agricultural University/Key Labora tory of Crop Physiology and Ecology and Production
2
Management, Ministry of A
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