鸭疫里默氏杆菌鸭病毒性肝炎病毒的分离鉴定与卵黄抗体的制备研究.pdfVIP

河南农业大学硕士研究生论文 摘 要 本研究以鸭疫里默氏杆菌和鸭病毒性肝炎病毒为研究对象，首先从郑州郊区某鸭场采集 病鸭，分离得到鸭疫里默氏杆菌，经生化鉴定、血清型鉴定、RA的药物敏感性试验与病原 性试验，证明分离得到的为I型RA菌株。将此分离株分别在血清肉汤与鸭胚上进行增菌培 养，结果表明其在鸭胚上的增菌培养效果明显优于血清肉汤。将所得菌液经0．5％福尔马林 灭活后，加入氢氧化铝胶作为佐剂，安检合格后保存。 又从郑州郊区某鸭场采集病鸭，分离得到鸭病毒性肝炎病毒。并通过血清中和试验、病 毒的血凝性测定、动物回归试验等证明分离到的确实为I型鸭病毒性肝炎病毒，其EID50为 10．4·引。 将鸭疫里默氏杆菌和鸭病毒性肝炎病毒分别灭活后混合制成油乳佐剂，经过无菌检验、 安全检验后对50只健康高产蛋鸡进行免疫，经鸡胸和腿部皮下及肌肉多位点注射，于第10 d和20d分别接种2ml和4 ml。免疫后每日收集鸡蛋，编号后于4℃保存。采用双向免疫 扩散和免疫电泳测定免疫后鸡卵黄中鸭疫里默氏杆菌和鸭病毒性肝炎病毒抗体含量及其效 价的变化，结果表明，母鸡初次免疫后第10天卵黄中即可测出相应抗体，第20天(第二次 免疫)后抗体效价明显提高。取第二次免疫后第10天到第40天的卵黄，进行IgY的提取。 取卵黄粗提物行免疫电泳／扩散进行抗体鉴定，其可与制备的DHV、RA抗原出现明显的沉 淀反应。并对提取得到的IgY进行蛋白含量测定，其最终浓度为2．258 mg／mL。 关键词：鸭疫里默氏杆菌；鸭病毒性肝炎病毒；高免卵黄 河南农业大学硕士研究生论文 And ControlOfRiemerella Isolation，Identification Integrated AndDuckViral Anatipestifer Hepatitis Baoan Supervisor：Prof．Cui MasterCandidate：JiaYun．fei ABSTRACT toresearchthesickducksclinical andcutexemination According symptoms hasbeen fromaduck in changes，RiemerellaAnatipestiferinvestigated farmingfactory inorderto thebacteriafromsick examinationswerecarried Zhengzhou，andidentify ducks，the out in asthemaincharacteristicsofabacterial the laboratory,such patterns，cultivating mainly and characteristicswere thatthe characteristics observed factors，biochemical growth growth reactionsandtheidentificationofanimal werefurtherconfirmedinfectionof