pax2及ai1基因在乳腺癌他莫昔芬耐药机制中的作用的实验研究.pdf

lIll(1lll(ill([(ttlll(1ill([1llt[itllt[(1111(Il 990 Y2581 目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………6 研究论文PA_X2及MB1在乳腺癌他莫昔芬耐药机制中的作用的实验 研究 前言……………………………………………………………………一12 目JJ吾………”……………一…………………………………………” 材料与方法…·．………………………………………………………”12 结果……………………………………………………………………29 附图……………………………………………………………………34 附表……………………………………………………………………47 讨论………………………………………·………···………………一51 结论………………………………···……·……………·…···………·55 参考文献………………………………………………………………55 综述共调节因子在乳腺癌ER介导的信号转导通路中的作用…………60 致谢…………………………………………………………………………70 个人简历……………………………………………………………………71 中文摘要 PAX2及AIBl在乳腺癌他莫昔芬耐药机制中的作用 的实验研究 摘 要 目的： 乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，严重危害着女性的生命和健 康。近年来我国乳腺癌的发病率持续上升，且发病年龄呈年轻化。内分泌 治疗以其副作用小、效应持久，成为乳腺癌最重要的治疗手段之一。他莫 昔芬是一种选择性雌激素受体调变剂，用于绝经前雌激素受体阳性的乳腺 癌患者的内分泌治疗。目前临床上约40％雌激素受体(estrogenreceptor, ER)阳性的乳腺癌患者对抗雌激素治疗产生耐药，而具体机制尚不明确。 码成对基因盒2，其最早从果蝇中发现，被认为是抑癌基因WTI的转录 的表达水平相关，而抗雌激素治疗的代表药物他莫昔芬耐药的乳腺肿瘤特 1在雌激素受体阳性 制中的研究鲜有报道。鉴于此，本文对PAX2和tLIB 的乳腺癌细胞中的表达及其调控HER2表达的相关机制进行了较为系统 的实验研究，为他莫昔芬耐药机制的相关研究提供了分子生物学基础。 方法： 1细胞培养与处理 640 MCF一7细胞常规培养在含有10％胎牛血清、1oo肌青链霉素的RPMI．1 培养基中，置于含5％C02的37摄氏度恒温恒湿培养箱中培养。采用 理24h。9nM针对HER2的抑制剂Lapatinib预处理0．5h。 2siRNA和质粒转染 分别用1 siRNA和PAX2siRNA转染MCF．7细胞 00pmol阴性对照NC 1 24h后，再给予1州T删处理24h，同法将AIB 中文摘要 进行实验研究。分别用1嵋表达AIBl的质粒和作为阴性对照的空载体质 粒转染MCF．7细胞中，再给予1 处理24h，同法将PAX2质粒转染 MCF7／TAMR细胞并处理。 blot) 3蛋白免疫印迹(Western 提取细胞总蛋白，用蛋白免疫印迹方法检测各蛋白的表达情况，再通 过Od