cds表达的tr49在约氏疟原虫感染早期的免疫调控作用.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………．．1 英文论著摘要……………………………………………．．6 二、英文缩略语………………………………………………12 三、论文 刖舌……………………………………………………前言……………………………………………………113一 材料与方法………………………………………………14 实验结果………………………………………………．．17 讨论……………………………………………………28 结论……………………………………………………30 四、本研究创新性的自我评价…………………………………．．31 五、参考文献………………………………………………．32 六、附录 综述…………………………………………………．．35 在学期间科研成绩…………………………………………46 致谢……………………………………………………49 个人简介………………………………………………．．50 ·中文论著摘要· DCs表达的TLR4／9在约氏疟原虫感染早期的免疫调 控作用 ．▲上_—J一 刖 吾 疟疾是由疟原虫感染引起的最为严重的寄生原虫感染性疾病。严重的疟疾疫 情正是造成发展中国家儿童高死亡率和成人高发病率的主要原因。而疟原虫抗原 变异和耐药性原虫的出现，又进一步阻碍了疟疾疫苗的研制和抗疟药物的开发。 因此，寻求新的疟疾疫苗靶点将无疑是疟疾控制的重中之重。 啮齿类疟原虫感染小鼠为深入探讨抗人疟保护性免疫应答机制，提供了一种 宝贵的实验动物模型。约氏疟原虫(Plasmodium 17XL)感染的不 yoelii17XL，e．y 同小鼠，会呈现不同的Thl细胞免疫应答模式，因而导致其出现自愈和死亡两种 截然相反的感染结局。因此，疟疾感染早期Thl细胞免疫应答的有效建立明显影 响着感染进程和最终结局。在这一过程中，DCs是决定Th免疫应答的关键效应细 胞。作为活化树突状细胞(dendriticcells，DCs)众多效应分子之一的Toll样受体 (Tolllike receptor，TLR)对于其成熟和功能发挥起着举足轻重的作用。同时啮 齿类研究表明，TLR2／4可通过识别疟原虫锚定在糖复合物上的糖基化磷酯酰肌醇 素可通过TLR9启动天然免疫应答。 我们利用成功建立的Py17XL感染的BALB／c和DBA／2鼠疟模型，分析了 参与抗疟免疫应答调控的相关因素。前期的研究结果显示，两种不同易感性的小 鼠在感染过程中，TLR4／9表达程度不尽相同。本研究通过外源性给予TLR4／9激 动剂或抑制剂，动态观察其对于不同易感性小鼠感染模式及结局的影响、免疫效 应细胞及产生细胞因子的变化，以期为疟疾疫苗丌发提供新的靶点。 实验方法 1、实验动物、疟原虫及主要试剂 17XL(同本爱媛大学分子 究所提供(许可证编号：SCXK京200420001)；P．y 照组A151(Takara合成)。 2、动物分组与TLR4／9激动剂抑制剂处理及感染 17XL不同易感程度鼠疟模型：易感型BALB／c小鼠和抵抗型DBA／2小 (1)P．y 鼠； (2)TLR9激动剂及其对照组处理组模型：感染前2d，分别经胫骨前肌肉注射给 TLR9激动剂对照组CPGl982，50pg／只； TLR4激动剂LPS，25lag／只； (4)TLR9抑制剂及其对照组处理组模型：感染前1d，分别经腹腔注射给予抵抗 上述小鼠分别经腹腔感染1x10617XL寄生的红细胞，感染不同时间小鼠 P．y 经尾静脉采血，制备薄血膜，Giemsa染色，镜检计数红细胞感染率，并每同观察 生存率。 3、脾细胞培养 不同鼠疟模型小鼠于感染0d、3d矛N5d常规无菌摘取脾脏，常规方法制备脾细 收集上清，．80。C保存，待细胞因子测定。