双歧杆菌、大肠菌菌体多糖对iiel细胞激活作用的对比研究.pdfVIP

中文摘要 } I双歧杆菌是人类和动物正常肠内微生物群的主要成员之一。 其分布广泛且数量大，但无毒、元害，而且具有许多生态效应及生 理意义。它能够调整肠功能紊乱，降低血内毒素水平，降低胆固 醇，具有抗肿瘤作用，提高免疫力，尤其可明显的促进黏膜免疫功 能，同时是一种有效的抗感染的微生态制剂，但对它的免疫机制待 进一步深入研究。小肠上皮间淋巴细胞(intestinal intraepithelial 强的细胞毒作用。iIEL细胞可以通过丝裂原诱导的细胞毒作用及 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用发挥杀伤活性。同时，ilEL细胞 还能分泌众多的细胞因子，如IL一2、IL一3、IL一4、IL一5、IL一6、 子刺激NK细胞的生长并增强其杀伤肿瘤细胞的活性，同时IL一2 又是细胞旁分泌生长因子，能刺激局部IgA类抗体的合成，新近的 研究表明iIEL细胞分泌的IFN、参与了抗免疫缺陷病毒、呼肠病 毒感染免疫，并在抗弓形体和隐孢子体感染免疫中起关键的枢纽 作用，体外实验尚证实iIEL细胞能释放增强上皮细胞上MHCⅡ类 分子表达的细胞因子。这可能与肠黏膜的抗原呈递过程有关。因 此ilEL细胞通过多种途径参与肠道黏膜免疫，发挥其抗感染和抗 肿瘤的作用。广]7 本实验是应用ilEL细胞功能作为基础来判断双歧杆菌的应 用价值，从小肠内提取高纯度的iIEL细胞，并对其抗原表型进行 鉴定。用双歧杆菌和大肠杆菌的细胞壁提取成分与iIEL细胞直 接孵育作用，检测其对iIEL细胞的自然杀伤活性及IL一2、IFN，产 生情况的影响，用来判断双歧杆菌制剂的应用价值，并对它的作用 机制进行初步的探讨，为其应用提供理论依据。 } f首先采用机械分离法和Percoll非连续密度梯度离心法从小 鼠小肠提取高纯度的ilEL细胞采用双抗原标志，应用间接免疫荧 光法对其抗原表型进行测定；同时，应用有机溶剂提取的双歧杆 菌、大肠杆菌菌体多糖与ilEL细胞共同孵育作用后，检测iIEL细 胞的自然杀伤活性、IFN一、／和IL一2产生能力。结果表明：(1)iIEL 自然杀伤活性为53．75±5．21％，大肠杆菌菌体多糖组ilEL细胞 的自然杀伤活性为21．65±3．54％，与对照组相比16．92± 1．98％，有明显差异，但双歧杆菌菌体多糖的作用强。(3)双歧杆 菌多糖组能够产生IL～2，9．77±1．71u／ml，大肠杆菌多糖组：4．6l 双歧杆菌多糖组产生IFN，166．5±4．7u／ml，大肠杆菌多糖组产生 异。双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖均能增加ilEL细胞的自然杀伤 活性，并能促进ilEL细胞产生IFN7和IL一2，但双歧杆菌菌体多 糖的作用强。 ilEL细胞膜表面抗原的表型73．8％以上为CD。+T细胞。且 有43．8％表达TCR扪实验结果符合文献报道。文献报道iIEL细 胞中有40．6％TCR。8T细胞和46．4％TCR惦T细胞。由于人的其 他部位请T细胞很少，ilEL细胞是，。T细胞库。怫T细胞在肠道中的 大量出现使人们更加注意它的粘膜免疫功能，粘膜和上皮组织是 微生物入侵机体的第一道防线，同时亦是肿瘤常发生的部位，因 此，，。T细胞在抗微生物和寄生虫感染以及抗肿瘤免疫中的作用很 引人注目。已发现ilEL细胞的细胞毒作用明显，有直接裂解靶细 胞的能力，类似于细胞毒性T细胞(CTL，CD。+)，同时又产生众多 的细胞因子，又类似于辅助性CD。+细胞。新近研究表明在感染利 什曼原虫、疟原虫、血吸虫、流感病毒、HIV、单纯疱疹病毒和6型 ·2· 人类疱疹病毒等致病微生物感染中，人们发现，。T细胞发挥很重要 的抗感染作用。同时它的免疫监视功能更是不容忽视。可以看出 它在肠道免疫中发挥很大作用。 双歧杆菌对宿主有许多有益无害的作用，在调整肠道菌群的 临床应用中显示出较好的疗效，它的研究范围正在不断扩大。双 歧杆菌菌体多糖对菌体的保护性包被可更好地耐受胃酸和胆汁， 增强对肠粘膜的粘附作用。本实验报道了双歧杆菌对小鼠TNF、 IL—l、IL一2等3种细胞因子有诱生作用，提示双歧杆菌可能通过 细胞壁成分发挥免疫调节作用，双歧杆菌细胞壁表面富含大量糖 类，主要为肽聚糖和多糖，推测可能是糖类成分在起作用。本研究 的目的就是要阐明双歧杆菌菌体多糖对机体的免疫激活作用，并 用大肠杆菌菌体多糖做对比研究。在实验中发现两者均能提高 iIEL细胞的自然杀伤