nk细胞的分离化及杀瘤活性与肿瘤细胞表面micab表达的相关研究.pdf

一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………………………l 英文论著摘要……………………………………………………………………．．3 二、英文缩略语………………………………………………………………………·6 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………一1／ 刖舌…………………………………………………………………………………………………………一 材料与方法………………………………………………………………………”9 结果…………………………………………………………………………………………………………14 讨论…………………………………………………………………………………………………………19 结论…………………………………………………………………………………………………………2l 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………22 五、参考文献…………………………………………………………………………23 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………24 在校期问科研成绩………………………………………………………………33 致谢………………………………………………………………………………34 个人简介…………………………………………………………………………35 ·中文论著摘要· NK细胞的分离纯化及杀瘤活性与肿瘤细胞表面 MICA／B表达的相关研究 目 的 1、通过相对简单的方法分离纯化人外周血NK细胞，对纯化条件进行优化， 并进行培养，建立一种经济高效的NK细胞纯化、培养及鉴定的方法； 2、检测NK细胞对不同肿瘤细胞的杀伤活性，为NK细胞的临床应用提供实 验基础； 3、探讨NK细胞杀瘤活性与肿瘤细胞表面MICA／B表达的相关性，为提高 NK细胞的杀伤敏感性提供基础。 方法 1、人外周血NK细胞的分离纯化及检测 法分离人外周血NK细胞，流式细胞术检测NK细胞的纯度，对几种方法进行比 较和优化； 2、NK细胞杀伤活性的检测 采用CCK．8法检测不同效靶比时NK细胞对白血病细胞K562、肾癌细胞 769一P、乳腺癌细胞Bcap37、肺癌细胞A549的杀伤活性。 3、肿瘤细胞表面MC加的表达 采用流式细胞术检测人白血病细胞K562、肾癌细胞769．P、乳腺癌细胞Bcap37 及肺癌细胞A549表面MICA／B的表达。 结 果 1、NK细胞的分离纯化 单抗铺皿法、补体裂解法、percoll不连续密度梯度离心法分离NK细胞的纯 2、NK细胞对肿瘤细胞的杀伤率 NK细胞对同一肿瘤细胞的杀伤活性，在不同效靶比之间，差异有显著性(尸 O．05)。 3、肿瘤细胞表面MICA／B的表达 4、NK细胞杀瘤活性与MC～B表达的相关研究 瘤细胞，随着效靶比增加，相关性增强。 ：口结论-，己 l、对NK细胞的几种纯化方法进行比较，其中RosetteSep⑧改进法可以获得 高纯度的NK细胞，是一种经济，快速简便，并且纯化率高的分离方法； 2、NK细胞的杀伤敏感性与肿瘤细胞表面MIC～B的表达水平相关，肿瘤细 胞表面MICA／B的表达水平影响NK细胞的杀伤活性。 关键词 NK细胞；纯化；肿瘤细胞；MIC～B；细胞毒性实验；相关性； 2 ·英文论著摘要· on ofNKcellsandthe Studypurification relationship celllines the ofMIC