谷氨酰胺对低出体重新生大鼠缺氧性肠损伤肠道igf-1及igf-1r水平的影响.pdfVIP

谷氨酰胺对低出生体蘑新生大鼠缺氧性肠损伤肠道IGF-1及IGF．1R水平的影响 中文摘要 谷氨酰胺对低出生体重新生大鼠缺氧性肠损伤肠道 lGF-1及IGF-1R水平的影响 中山大学附属第二医院儿科 专业方向：新生儿学 硕士研究生：徐芬 导师：苏浩彬副教授 中文摘要 1．背景与目的 新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing 是早产几常见消化系统急症，伴随NICU的建立和发展以及机械通气和肺表面活性 物质的应用，许多早产儿在度过呼吸系统并发症后常面临消化系统障碍，因此随 着早产儿存活率增长，该病近几十年亦有增加趋势。在极低出生体重儿(VLBWI) 中，2％～5％发生NEC“1，存活者常留有短肠综合征。NEC确切发病机制不明，有报 道认为低出生体重可能为发病高危因素之一。近年随着研究的深入，谷氨酰胺 和对免疫功能的调节成为NEC发病机制和防治的新热点之一。谷氨酰胺作为“免 疫营养素”不仅补充营养物质的缺乏，更以特定的方式刺激免疫细胞增强免疫应 答，维持jF常适度的反应，调控细胞因子的产生和释放，减轻有害或过度的炎症 反应，维持肠屏障功能，减少感染的发生。而胰岛素样生长因子-l(Insulin-like growthfactor—l，IGF—1)作为重要的胃肠道激素之一，在新尘儿消化系统结构和 谷氦酰胺对低出生体番新生大鼠缺氧性肠损伤肠道IGF-I及IGF．IR水平的影响 中文摘要 功能的成熟与完善方面起着非常重要的作用。研究发现IGF—l同样能促进肠上皮 细胞生长增殖及免疫细胞的增殖活化。目前临床上有关使用谷氨酰胺的资料尚少， 特别是新生儿或早产儿静脉给予的应用剂量和效应问的相互关系不甚明确。谷氨 酰胺通过何种途径促进小肠粘膜上皮细胞增殖，维持肠屏障功能以及与胰岛素样 生长因子问作用，特别是当宫内发育迟缓或低出生体重新生儿发生肠损伤甚至坏 死性小肠结肠炎时两者是否存在联系等均不甚明了。 本实验用被动吸烟法建立低出生体重新生大鼠模型并制作缺氧诱导NEc病变， 研究缺氧肠损伤及谷氨酰胺的保护作用，对比药物干预前后肠损伤严重程度，了 解胰岛素样生长因子一l、胰岛素样生长因子一1受体的动态变化。探讨谷氨酰胺对 低出生体重儿或早产儿发生缺氧肠损伤甚至NEC时治疗的可行性。 2．研究材料与方法 2．1研究对象： 新生低出生体重SD大鼠 2．2研究方法 2．2．1动物模型建立将发情期SD雌性大鼠与雄鼠合笼，以发现精虫为妊 娠第一天，孕鼠于孕d10起置于烟雾吸入箱中，每天熏烟四次，每次3支，燃烟 时间为lO’15分钟，两次间隔为2小时，吸烟至自然分娩。以初生体重小于相同 饲养环境非吸烟条件下正常SD新生大鼠体重1个标准差(ISD)为LBW鼠标准， 共获得72只，另留取制模过程中正常出生体重的新生鼠和非吸烟条件下正常体重 新生鼠各24只作为对照。 2．2．2实验动物分组实验动物按随机分配原则分为五组，如下： A组为非吸烟条件下正常体重对照组：B组为吸烟条件下手常体重对照组；72 只新生LBW大鼠分为三组。C组：空气+生理盐水组，D组：缺氧一复苏+生理盐水组， E组：缺氧一复苏+谷氨酰胺组。C组置于空气中，D组和E组LBW新生大鼠连续三天经 组织观察其损伤情况，’每组备时『日J点新，￡鼠均为8只。 动物模型缺氧一复苏(H／R)处理先给特制缺氧舱通入二二氧化碳气体，浓度 ¨ 谷氨酰胺对低出生体鼋新生大鼠缺氨性肠损伤肠道1GF-I及IGFoIR水平的影响 中文摘要 达100％后，放入1日龄新生LBW鼠5min后取出，迅速给氧舱通入纯氧使舱内浓度达 100％，再将缺氧后新生鼠放入舱内5min取出，接着放4℃冷环境中持续lOmin，待 处理结束后所有新生鼠均放回母鼠身边喂养，连续三天，每天两次。同时D组与E 组动物在每日缺氧处理前分别腹腔注射生理盐水和谷氨酰胺。各组均母乳喂养。 2．2．3标本采集及处理 各组于d4、d7、dlO断头处死新生鼠，留取近回 盲部l～2cm处回肠，置于10％福尔马林溶液中固定，制备石蜡切片，其余肠组织制