钙黏附素和β-接素与宫颈上皮内瘤变进展的关系研究.pdf

钙黏附素和且．连接素与宫颈上皮内瘤变进展的关系研究 摘要 钙黏附素和B一连接素与宫颈上皮内瘤变进展的关系 研究 专 业： 妇产科学 同等学力硕士： 张娟娟 指导教师： 林仲秋教授 摘 要 宫颈癌是妇女常见的恶性肿瘤，随着我国开展宫颈癌的筛查，特别是对宫 颈癌的癌前病变一宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelialneoplasia，CIN) 的诊断和及时治疗，使宫颈癌的总体发病率有所下降。宫颈上皮内瘤变CIN指 的是富颈癌前病变至原位癌的连续过程，依据宫颈上皮细胞不典型增生的程度 分为I、II、III级。CIN的自然病程可能有3种结局，即病变消退、维持不变和 病变进展。由于12～50％未经治疗的重度宫颈癌前病变能进一步发展成为浸润 癌，目前临床仅仅根据形态学改变无法判定究竟哪种癌Jii『病变可能消退，进展 或持续存在，因此，如果使用某种特异的分子生物学指标能够辅助判定宫颈癌 前病变的转归，对于临床采用不同的治疗手段将有重要的指导价值。钙黏附素 间、细胞与基质之间粘附反应的重要媒介，对维持组织结构形态起重要作用。 或缺失，与肿瘤的发生、浸润、转移等密切相关，也与宫颈癌的分化的浸润关 V 钙黏附素和日琏接素与宫颈上皮内瘤变进展的关系研究 摘要 其在CIN各级中的表达情况还有待在临床中进一步的明确，为最终明确其在CIN 进展中的作用提供依据。本课题应用免疫组化方法，观察E-cadherin和且 的关系，为临床判断CIN的潜在恶性程度提供指标。 研究目的 达，探讨其与宫颈上皮内瘤变进展的关系。 材料与方法 1．研究对象 选取深圳市第五人民医院2005年12月～2006年12月经电子阴道镜检查， 宫颈活检组织标本5l例。所有病例13种高危人乳头瘤病毒HPV检测(第二代杂 状上皮移位(columnar I级9例、CINII级18例、CINIII ectopy)lO例、CIN 级14例。所有病例术前均未实行放化疗或宫颈物理治疗，资料完整，且经病理 证实。全部标本经10％福尔马林固定，石蜡包埋。 2．检测试剂 sP试剂盒(即用型)、DAB试剂盒均购自北京中杉金桥公司， 采用微波抗原修复(pH8．0枸橼缓冲液)。 3．实验方法 临床收集宫颈活检组织标本，应用免疫组织化学方法检测E-Cadherin和B VI 钙黏附素和B施接素与宫颈上皮内瘤变进展的关系研究 摘要 一atenin蛋白的表达。采用S-P法染色，切片常规脱蜡水化后，加入过氧化物酶 阻断溶液阻断内源性过氧化物酶的活性，抗原修复后加入第一抗体，4℃冰箱过 夜后，加入生物素标记的第二抗体，室温下孵育后再加入链霉素抗生物素蛋白一 过氧化物酶溶液，DAB显色，苏木素复染，脱水、透明、封片。用PBS代替一抗 作阴性对照；分别用已知阳性的结肠癌组织切片作阳性对照。 4-结果的判定 采用免疫组织化学S-P法，用结肠黏膜组织切片作为阳性对照，PBS液代替 一抗作为阴性对照，DAB显色。光镜下观察并摄片，阳性标准为细胞膜上、细胞 质或细胞核内出现棕色颗粒。 正常表达为膜表达，在膜上或膜质同时表达，且阳性细胞面积大于观察面积 的8096为正常表达。异位表达包括胞质型、异质型，异常表达有胞质型、异质型 表达及表达缺失。 阳性信号采用图像分析仪进行定量分析。每张切片在光镜下取5个高倍视 野，输入计算机，经病理图文分析系统测量其平均光密度值(A)，通过平均光密 度的数值来比较其表达强度的高低。