铁代谢及nrfare通路在老化小鼠脊髓中的改变.pdfVIP

中文摘要 铁代谢及Nrf2／ARE通路在老化小鼠脊髓中的改变 摘 要 “老化”是活的有机体逐渐经受有害的改变的过程，随 着机体的老化，最终会导致结构的破坏，功能的下降，增加 疾病或死亡的可能性。已经有很多文献报导很多神经变性疾 病与老化有关，包括阿尔茨海默病，帕金森病，运动神经元 病等。然而在老化进程中其确切的分子机制是不清楚的，已 经有大量证据证实在老化和中枢神经系统退行性病变中存 在氧化应激和铁的异常沉积。通过了解中枢神经系统老化的 进程和机制可以帮助我们进一步理解这些相关疾病的临床 表现和进展。 铁是人体最丰富的微量元素，由于其独特化学反应活 性，在维持细胞和机体的正常代谢过程中起着至关重要的作 用，如氧的输送、线粒体的氧化反应、神经递质和DNA合成 等。然而，自由铁能通过Fenton反应生成具有高度反应性的 羟自由基，导致氧化应激，从而损害机体的一些基本成分， 如脂质，蛋白，DNA等，导致细胞损伤。所以维持机体内铁 的平衡对于机体是非常重要的。在脑外，细胞与组织的铁平 (transferrin 控制，细胞内铁浓度发生变化时，机体有能力通过细胞质内 的铁调节蛋白(iron mRNA上的铁反应元件(ironresponse 化来调节这二种蛋白的表达，进而使细胞内铁保持在正常水 中文摘要 平。铁减少时TfR表达增加而Ferritin表达减少，反则反之。 于IRP／IRE调节。 在老化过程中氧化应激(oxidativestress)起重要作用。氧 化应激是指体内的自由基及其产物超过了机体的抗氧化防 御机制的一种病理状态，它通常是由于体内的自由基显著增 高和／或机体的抗氧化防御功能下降所致。Nrf2／ARE系统是 抵抗各种环境应激和内源性应激防御机制中必不可少的部 分。Nrf2是具有基本亮氨酸拉链结构的一种核转录因子，正 常情况下存在于胞浆内，Keapl蛋白可以特异的结合在Nrf2 的氨基端，使Nrf2的活性受到抑制。当诱导剂存在的情况下， Nrf2磷酸化，向细胞核内转移，磷酸化的Nrf2进入核内后， antioxident response 反应元件，是顺式作用元件的一段增强子序列。在许多解毒 ARE序列，因此，ARE介导细胞内参与氧化应激的基因转录 水平的激活，Nr亿／AI也信号的增强表达，上调多种抗氧化酶、 解毒酶的表达，强力升高细胞的抗氧化和解毒能力。其中血 红素氧合酶(heme 体的一种蛋白酶，催化血红素产生胆绿素、一氧化碳(co)和 铁，胆绿素再形成胆红素，二者是体内强有力的自由基清除 剂。CO作为一种重要的细胞信息分子，在细胞功能和通讯的 调节中也发挥重要的信号转导作用。HO是进化上高度保守 的基因，但两种同工酶(HO．1、HO．2)基因的定位、结构及调 控明显不同。HO．1为诱导型，各种刺激、低氧、血红素、过 2 中文摘要 渡金属、NOSs的一些诱导因子如LPS和细胞因子等都可以诱 导HO．1的表达，提高细胞的抗氧化能力，发挥细胞保护作用。 dinucleotide 大多数真核生物细胞中普遍存在的一种黄素蛋白酶，主要存 7在于细胞质，但微粒体、线粒体、高尔基体中均可检测到该 ． 或NADPH作为电子供体，催化体内的醌类化合物的还原反 应，从而对醌类物质的损伤形成一种保护机制。NQ01参与 维生素E介导的抗氧化反应，使细胞抗氧化剂维生素E保持还 原状态。NQ01能够充当辅酶Q(泛醌)的还原酶，使其保持在 还原状态从而保护细胞膜组织不被氧自由基损伤。 目的：本实验用ICR小鼠作为研究对象，研究不同时期 变化，进一步理解中枢神经系统老化的进程和机制，有助于 我们理解这些相关疾病的临床表现和进展。 方法： 1、实验分组 分三组：分别为1个月，5个月，13个月 的雄性ICRd、鼠，每组6只，共18只。 2、取材新鲜取材：用10％的水合氯醛麻醉小鼠，迅速断 头，取出脊髓，液氮冷冻，然后．80℃保存。 3、目的蛋