放射配基法研究囊收缩素（cck）受体在人的食管下括约肌的表达.pdfVIP

中文摘要 放射配基法研究胆囊收缩素(CCK)受体 在人的食管下括约肌的表达 摘 要 目的：食管下括约肌是食管胃连接部增厚的肌束，由内层 大弯侧的套索纤维(slingfibers)和小弯侧半环形的钩状纤维 fibers)构成，这两束肌肉共同维持LES的关闭状态， (clasp 其收缩和舒张功能调节机制非常复杂，包括神经系统、体液 因素以及自身肌源性因素等多种因素。胃肠肽类激素作为体 液因素的主要组成部分，承担着不可替代的作用。CCK是一 类能引起胆囊收缩的胃肠道多肽激素，具有调节胆囊收缩，胰 腺分泌，促进?胃排空等功能。现在，CCK成为一类典型的 脑肠肽，能够以神经递质或神经调质的形式发挥生理作用，所 有这些生理作用都是其作用于相应受体而产生的结果。CCK受 体根据其对CCK类似物和胃泌素及特异拮抗剂的亲和力差 异而分为两种亚型—CCKA受体和CCKB受体，并且有人将 胃泌素受体与CCKs受体统称为CCKB胃泌素受体。本研放 射配基受体结合分析法，研究CCKA受体和CCKB受体与其 激动剂3H．CCK．8s的结合力，以及两个受体分别在人的LES 的钩状纤维和套索纤维的表达情况，以证明哪种受体和那条 肌纤维对LES的调节作用更占优势。 第四医院因食管中段癌行食管大部切除术患者7例，采集未 条，1)用组织匀浆器加入TBS液4℃匀浆，匀浆液以4℃， 中文摘要 的膜蛋白提取试剂盒，将沉淀运用膜蛋白萃取法制备受体膜 蛋白，考马斯亮蓝G．250定量后存于．80℃备用。3)取等量受 的存在及初步比较其条带。4)以3H．CCK．8s为标记配基， u 用反应体系总体积为200 分结合，4。C恒温振荡孵育10h，进行饱和试验。然后分别加 至反应体系重复前面的过程进行竞争抑制试验。以49型硝 基玻璃纤维滤膜采用负压抽滤的办法分离结合和游离配基， 含有结合配基受体的滤膜置于液体闪烁计数仪中计数。实验 Prism4软件和SPSS11，5软件分析。 结果用Graphpad 结果：1 由蛋白印迹试验得出CCKA受体和CCKB受体 在钩状纤维和套索纤维均表达，钩状纤维上，CCKA受体和 CCKA受体在套索纤维上和钩状纤维上无统计学差异 统计学差异(仁1．439，p=0．224)。 2饱和试验中得出饱和曲线，并得出在LES的套索纤维 上3H—CCK．8s与CCK受体的最大结合量B。。5为 而在钩状纤维上二者的最大结合量B。。。为 中文摘要 与3H．CCK-8s的最大结合量在钩状纤维和套索纤维上有统计 多。 3竞争抑制实验中得出CCKA受体和CCKB受体拮抗剂 的竞争抑制曲线，同时在LES的套索纤维上CRl409的半量 者对3H．CCK．8s和CCK受体结合的抑制作用有统计学差异 的。但是CRl409在钩状纤维和套索纤维上无统计学差异 计学差异(户1．93，P=0．126)。 ’ 结论：1 体结合的情况优于钩状纤维上的情况。 2 CCKA受体的特异性结合的抑制作用比CCKB受体拮抗剂 CR2945更明显。 3 两肌条间拮抗剂与各自受体的亲和力无差别。 中文摘要 合量和平衡解离常数在钩状纤维和套索纤维上的差异可由 CCKA受体在套索纤维比钩状纤维分布较多引起的。因此 用中，承担着更为重要的药理学作用。 合实验方法：食管下括约肌。 英文摘要 of inhuman’s Cholecystokininreceptor Investigation lower esophagealsphincterbyanalyzing data radioligandbind