中波紫外线对体培养hacat细胞mapk信号通路的影响.pdf

基金项目 国家自然科学基金面上项目81171513 ）； 江苏省基础研究计划（自然科学基金）面上项目（B）； 2013 年高等学校博士学科点专项科研基金（20131106120046 ）； 2014 年北京协和医学院协和青年科研基金（3332014008 ）。 II 中波紫外线对体外培养HaCaT 细胞MAPK 信号通路的影响 中文摘要 中波紫外线对体外培养HaCaT 细胞MAPK 信号通路的影响 中文摘要 目的：探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT 细胞MAPK 信号通 路受调控效应。 方法：1.5、4.5 、7.5、10、20 、30、50mJ/cm2 中波紫外线照射HaCaT 细胞后8h， 对照组细胞除不进行UVB 照射外，其他处理同各剂量UVB 组，蛋白免疫印迹法测 定ERK1/2 、JNK 和p38 蛋白表达及磷酸化水平；50 mJ/cm2 中波紫外线照射HaCaT 细胞，蛋白免疫印迹法测定照射后2 、4 、8、12h 4 个时间点，细胞ERK1/2 、JNK 和 p38 蛋白表达及磷酸化水平。使用Quantity One 软件计算目的条带吸光度，以相应蛋 白条带的吸光度值与GAPDH 蛋白内参条带吸光度值的比值表示相对蛋白含量。 结果：7.5、10、20 、30、50 mJ/cm2 UVB 照射HaCaT 细胞后8 h，ERK1/2 、JNK 磷酸化水平明显上调（P0.05 ），20 、30、50 mJ/cm2 UVB 照射HaCaT 细胞后p38 2 磷酸化水平上调显著（P0.05 ），且都在50 mJ/cm 照射后效应最为显著（P0.05 ）。 50 mJ/cm2 UVB 照射HaCaT 细胞后8h，ERK1/2 磷酸化产物水平出现上调，在处理后 的第12 小时，与对照组（10.277±0.320）比较，差异有统计学意义（44.844±2.023,P0.05 ）， 而p38 和JNK 磷酸化产物水平在照射后2 h 即开始上调（P0.05 ），第4 、8、12 小 时，p38 和 JNK 与对照相比，UVB 照射后虽仍然存在着显著地磷酸化水平差异 （P0.05 ），但随时间推移JNK 磷酸化产物水平这种上调的趋势逐渐弱化（P0.05 ）。 结论：在50mJ/cm2 中波紫外线照射后的HaCaT 细胞中，ERK1/2 、p38 、JNK 这 3 种MAPK 信号通路产生了活化效应，具有一定的时间效应差异。 关键词：紫外线；细胞，培养的；角蛋白细胞；信号传导；MAP 激酶激酶激酶类 作 者：徐倩倩 指导教师：施 辛 I Abstract Effects of ultraviolet B on the signaling of MAPK in human epidermal keratinocyte Effects of ultraviolet B on the signaling of MAPK in human epidermal keratinocyte Abstract Objective: To investigate the regulation effects on MAPK signaling of ultraviolet B (UVB) irradiation in the human epidermal keratinocytes. Methods:Keratinocytes were e