沙利度胺对人乳癌细胞血管内皮生长因子-c及其受体表达的影响.pdfVIP

中文摘要 沙利度胺对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子一C 及其受体表达的影响 摘 要 目的：通过体外实验观察沙利度胺对人乳腺癌细胞血管 endothelialfacto卜C， 内皮生长因子．C(vascular gro州h endothelial factor VEGF—C)及其受体(vasculargrowth 血管生成作用的可能机制，探讨其用于治疗乳腺癌的可行 性。 方法：选取两株经典的人乳腺癌细胞系MCF．7及 MDA—MB一23 l，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测沙利度胺 对细胞存活和生长的影响情况，从而选择适当的药物浓度及 作用时间。根据MTT的结果，设置对照及实验组。分别提 取各组细胞总RNA，鉴定其完整性及含量，通过逆转录一聚 合酶链反应(re01erstranscriptionPCR，RT．PCR)半定量检测沙 利度胺处理前后两株细胞中VEGF．C、KDRmRNA的表达水 观察沙利度胺处理前后MCF．7、MDA—MB．231细胞中 cytome衄，FCM)半定量检测沙利度胺处理前后两株细胞中 VEGF—C及KDR蛋白的表达水平。 结果：l 度范围内能明显抑制MCF．7和MDA．MB一231细胞体外增 中文摘要 殖，随着浓度增加抑制率相应升高，且均以120u∥m1组作用 48h抑制率最高。作用48h后不同浓度组对两株细胞抑制率 结果显示：沙利度胺处理前两株细胞均表达VEGF．C、Ⅺ)R mRNA，VEGF．C MDA一Ⅷ．231细胞中分别为O．669、O．815，KDRmRNA表 达相对值分别为O．289和O．435。MDA．MB．231细胞中二者 表达水平均高于MCF．7细胞，差异具有显著性(，PO．05)。沙 1 细胞VEGF．CmIⅢA表达抑制显著，比较两株细胞沙利度胺 处理前后VEGF—CmI矾A表达水平差异均具有极显著性 细胞，两者差异具有显著性(氏0．05)。沙利度胺60¨∥ml浓 度组作用48h对两株细胞Ⅺ)RmRNA表达有显著抑制作用 1细胞抑制程度较强，两者差 (PO．01)，并且对MDA．MB一23 异具有显著性(PO．05)。3免疫细胞化学检测结果显示：沙 利度胺处理前MCF．7、MDA．MB一231细胞中VEGF．C、KDR 染色均为阳性，两株细胞的胞浆或胞膜可见棕黄色着色。沙 利度胺处理前后比较VEGF．C及KDR在两株细胞中的染色 强度均减弱。4流式细胞术检测结果显示：沙利度胺处理前 和1．629。以MDA一Ⅷ．231细胞中二者表达水平较高，差异 抑制MCF一7和MDA—MB一23 1细胞VEGF．C蛋白表达，两株 ＼＼ 中文摘要 细胞处理前后的FI值比较差异均具有显著性(PO．05)。沙利 度胺60¨∥ml浓度组作用48h抑制两株细胞中I①R蛋白表 达，处理前后比较差异具有显著性(PO．05)，沙立度胺对两 株细胞中VEGF—C及KDR蛋白表达抑制程度比较差异无显 VEGF—C与KDR蛋白表达相关性检测结果 著性(尸O．05)。5 表达均具有相关性，厂值分别为0．903、O．874，尸值分别为 0．014和O．023。 结论：l沙立度胺在～