重组pegfpn1-cd146表达载体的构建及其对mda-mb-231细胞侵袭、凋亡的影响.pdf

重组pEGFP-N1一CDI 侵袭、凋亡的影响 中文摘要 目的：构建人类CDl46基因的表达载体，研究其对乳腺癌细胞MDA— MB-231细胞侵袭、凋亡的影响。 方法：采用分子生物学方法构建人类CDl46基因的表达载体，利用脂质 体Lipofectamine 46 blot分别检测基因CDl 下评价转染效果，利用RT．PCR、Western 在mRNA、蛋白水平上的表达效果。采用MTT法检测细胞在体外增殖的 能力；流式细胞仪法FCM检测细胞的周期分布及凋亡水平的变化情况； Transwell实验观察细胞侵袭能力改变。 mRNA Westernblot结果显示，与对照组相比，转染细胞后，实验组CDl46 和蛋白的水平表达均有增高(K0．05)；增殖实验结果显示转染后实验 组细胞增值能力较对照组细胞增高(尸O．05)；流式结果表明，与对照 验组细胞侵袭能力较对照组细胞明显增强(PO．05)。 时抑制细胞凋亡的发生，并促进细胞体外侵袭能力。 关键词：CDl46；MDA-MB-231细胞：侵袭；凋亡 Ill燃 l IlYlllllll2ll1087I[1llllll CD1 cancercellMDA·-MB--231 46 can humanbreast genepromote andinvasion proliferation Abstract the AIMTo theinhibitioneffectsofCDl46 on andinvasion investigate gene proliferation ofhumanbreastcancercellMB．MDA231． aseriesof CD1 Methods to molecularmethods,the46 According biology overexpression into Wasconstructed．ThevectorWastransfectedMB-MDA231 cells plasmid by and were the ofCDl46mRNAprotein analyzedby lipofeetamine,andexpression RT-PCRandWesternblot MTT wereusedtoobserve analysisrespectively．Thenassays to the effectofC