重组人-α干扰基因（hu-ifn-α）在草鱼体内的整合与表达.pdfVIP

重组人一Q干扰素基因(Hu-IFN-Q)在 草鱼体内的整合与表达 中文摘要 草鱼年产量占我嗣淡水鱼总产量的20％。其生长快、饲料来源广、饲养成本 低和肉味鲜美。但草鱼病害多，危害严重，目前草鱼由菌种养至成鱼的成活率仅为 10—15％，每年给我国淡水养殖业造成数亿元经济损失。特别是病毒性的草鱼出血病， 流行季节长，发病死亡率高，因此，对草鱼出血病的有效防治一直是世界各国水产 科学工作者艰苦探索而又未能找到理想解决办法的世界性难题。现代分子生物学技 术突飞猛进的发展为我们切底解决这一难题据供了可能性和有效途径。综观国内 外近些年来对转基因鱼的研究及结果证明，通过转基因定向培育出符合人们所需 要的优良鱼种是完全可能的，也是十分有意义的．通过基因转移进行鱼类抗病育 种研究，是鱼类转基因研究中的～个新的方向。 人．Ⅱ干扰索(hu-a．ⅡN)是人体因病毒感染或其它诱生剂作用等所产生的一 类非特异性抗病毒物质，是调节细胞功能的一类重要的糖蛋白。其作用是通过与细 胞膜上的特异性受体结合，引发级联性的信号放大过程，将信号最后传递到细胞核 内，对一系列基因的表达进行调控，并引发各种生理反应，整体性地提高自身的免 疫和抗病毒能力。本研究的目的在于以人的q．干扰索基因(IFN-a)作为目的基 因，与鲤鱼B．肌动蛋白基因启动子在体外重组，利用原核显微注射转基因技术将 人．n干扰素基因导入草鱼基因组而开展的抗病转基因草鱼育种研究，其结合了干 扰素和基因工程育种抗草鱼出血病病毒的优点，以期获得对草焦出血病具有天然 抗性的转基因鱼，并在此基础上培育出草鱼抗痛新品系。从而探索出一种从根本 上解决草鱼出血病的有效途径。 实验通过将hu-d-IFN基因重组分子采用显微注射法将这种重组基因转化草鱼 直接注射到选择好的受精卵核的动物极上．2000年共显微注射32197粒草鱼受精卵， 相关基因已在转基因草鱼体内染色体上得以整合，但整合位点没有固定区域，整合 尾草鱼中检出有入a．干扰素的表达即阳性率为23．5％。但基因表达水平在个体间有 很大差异。对EuSA检测呈阳性的转基因簟鱼接种草鱼出血病病毒的攻毒试验，证‘ 明了转基因鱼对草鱼出血病毒的抗性比普通草鱼提高了60-70％． 关键词：人．Ⅱ干扰素基因鲤鱼B．肌动蛋白基因启动子 显微注射 转化 草鱼 攻毒 草鱼出血病毒 and of integration expression Hu—Q—IFN recombination in genecarpgrass A bstract The in annual of 20*／0 freshwater covers total ofthe yieldgrasscarp output isfast andtastes of are fish,wMch growing delicious,besides,theforagesgrasscarp costof alower seriousdiseaesof various,with raising,However,at