重组人il-1基因表达载体转染角膜细胞及其抑制角膜移植排斥反应的实验研究.pdf

重组人IL-lO基因表达载体转染角膜细胞及其抑制角膜移植排斥反应的实验研究 L一1 重组人I o基因表达载体转染角膜细胞及其 抑制角膜移植排斥反应的实验研究 摘 要 养的新西兰大白兔角膜上皮细胞、基质细胞和内皮细胞，研究人II广10基因在角膜细胞的基因 移植排斥反应的基因治疗进行探索性研究。 材料和方法 白兔角膜，分别培养角膜上皮细胞、基质细胞和内皮细胞，以新一代高效原代细胞基因转染试 不同时间应用EusA方法、免疫组织化学方法和免疫荧光组织化学方法分析hⅡ，10基因在转 染角膜细胞后，培养的角膜细胞中人ILl0蛋白质合成、表达和细胞对IL广10的外分泌功能。3、 制做新西兰大白兔角膜碱烧伤新生血管模型，常规进行同种异体角膜移植，在角膜排斥反应征 应中的作用。 结果 pcDNA4／h 转染培养的兔角膜细胞后，蛋白质表达位于细胞浆内，免疫荧光共聚焦显微镜观察见ILl0染 达载体，对于严重角膜新生血管排斥反应模型均未能抑制排斥反应，其原因是多方面的，有待 4 重组人IL_10基因表达载体转染角膜细胞及其抑制角膜移植排斥反应的实验研究 于进一步探索。 结论 质在细胞浆中可见表达，并产生外分泌，细胞外液中EusA法检测蛋白含量明显升高。人 最佳试剂剂量控制、用药最佳时间、排斥反应模型的严重程度等密切相关。目前有大量ILl0 基因或I【厂10延长心脏、肝脏等移植物存活时间的报道，进行本项研究，将有利于角膜移植排 斥反应基因治疗的进一步探讨。 重组人IL10基因表达载体转染角膜细胞及其抑制角膜移植排斥反应的实验研究 about ofhumanjⅡte一删l【in-10on Experjmentalstlldy the既pressjon g蚰e cultu心dcomealcellsandthe ofimmune withit suppress rejection ABSTRACT humanintedeukin-10 object．丫e：Re∞mbiⅡcd geneexpression therecombinedvectorwastfansfccted in coⅡstmcted，a11d jmotheculturedrabbitcomealcells ViVoand Iocaltisseoftlle in wewanttohowifthehumaIlrecombined injected eyevitm，so jntcrleul【in-10Vector inculturedrabbjtcellsandits founctionon of risk expressed higll suppress comeal re姗biⅡedinterleakin-10Vector be usediIl for rejcctioⅡ．The may gcnethempy ∞mealimmune infIlture．Mate—alsandmethods：nefIlU DNAwas rejection