亚低温在脑缺血的保护作用及survivin和bcl-2的抗凋亡机制研究.pdfVIP

中文摘要 亚低温在脑缺血中的保护作用 及Survivin和Bcl．2的抗凋亡机制研究 摘 要 目的：脑血管病是常见病、多发病，通常急性起病，留 下严重的并发症，以其极高的致死率和致残率危害人类的生 命，其中缺血性脑卒中占全部脑血管病的70％。体温是影响 脑缺血预后的一个重要因素，发热通过多种机制可直接或间 接地与卒中相关。近来，大量基础及临床研究发现，亚低温 对脑缺血有明显的保护作用，但其具体机制尚不完全清楚。 低温可在不同方面抑制神经元缺血损伤的各种途径，从而有 望成为脑缺血治疗的有效方法。生存素一SuⅣivill，属于凋 亡抑制蛋白中的一员，具有重要的抑凋亡作用。因为Survivin 的独特分布特点，近来对其研究多局限于肿瘤治疗方面，脑 缺血损伤后引起的神经元凋亡是否有Survivin的表达，文献 报道较少。Bcl．2是首先从滤泡性淋巴瘤中分离出来的，现 已证实它是抑制组织细胞凋亡的基因，这些细胞包括肿瘤细 胞、心肌细胞、血管内皮细胞、神经细胞等。本实验通过对 脑缺血的动物模型实施亚低温治疗，观察Bcl-2表达，试阐 述低温的抑制凋亡机制，并观察神经细胞中是否有Survivin 的表达。 方法：SD雄性大鼠54只，随机分为2大组：假手术组 2亚组，分别为常温组一NO组和亚低温组一HY组；各亚组 分3个时间点：12、24、48h，各时间点为6只。模型制作： 中文摘要 采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉梗塞模型，低温组应用 冰块对大鼠大脑病变侧予以亚低温治疗，维持体温在 32．340C，持续4—6h，之后缓慢复温。常温组维持体温在初 始湿室。假手术组只麻醉后暴露血管，不插线。术后在各个 时间患：越嚼三种方法进行神经功能评分，之后过量麻醉处死 大鼠，版≯将脑组织冠状切成6个间隔2mm的脑片，其 中第4片用4％多聚甲醛固定，24h后石蜡包埋并切成69m 的组织切片。这些切片部分进行HE染色用以组织病理学分 余脑片给予TIC染色后固定，计算梗塞体积。 结果 l神经功能评分结果显示：低温组(2．17+0．75)大鼠行为 功能缺陷较常温组(3．17+0．75)明显改善，差异有显著意义， P0．05。 2脑组织切片HE染色光镜下观察：在缺血低温组和常 温组中，大鼠右侧大脑中动脉供血区可见染色欠佳的梗死 区。在这些脑区发现大脑中动脉及小动脉内皮细胞损伤并有 血栓形成，皮层和海马区的神经元胞核皱缩，胞浆空泡化。 两假手术组没有梗死灶，神经元胞浆饱满，染色均匀。 3 O．05。 4免疫组织化学结果显示：Bcl-2在缺血12h即在梗死 区的周边显著表达，主要定位于神经元的核膜和胞膜上，胞 中文摘要 表达，主要定位于神经元的胞浆中和小血管内皮细胞上。与 假手术组(5．32+1．02)的表达甚少，差异有统计学意义，P O．05。 结论 1亚低温(33～35。C)是有效的神经保护措施，可以通过 等机制，减少脑缺血后神经元凋亡，继而起到脑保护作用。 2 survivin作为抗凋亡家族的新成员，可以在脑缺血缺 氧损伤后表达。 3 亡抑制途径协同地保护受损脑组织。 关键词：线栓法：缺血性脑卒中；亚低温；生存素；B 细胞淋巴瘤／白血病．2基因 英文摘要 TheProtectiveEffectof inCerebral Hypothermia of Ischemiaandthe Mechanism Anti-apoptosis Bcl一2 Survivinand ABSTRA