同种异体大鼠骨间充质干细胞移植联合电刺激治疗下肢慢性缺血的实验研究.pdf

同种异体大鼠骨薯问充质干细胞移植联合电刺激治疗大鼠下肢慢性缺血的实验研究 中文摘要 第一部分 同种异体大鼠骨髓间充质干细胞移植治疗下肢慢性缺血的实验研究 目的：研究同种异体骨髓间充质干细胞在后肢缺血大鼠缺血肌肉组织内存活、迁 移、分化情况。评价同种异体骨髓间充质干细胞移植的治疗性血管生成作用及治 疗下肢慢性缺血的效果。 分成2组：A缺血对照组，BMSCs移植组：大鼠股动脉切断后7天接受同种异 体MSCs移植治疗(5×106MSCs／100ul，分6点注入大腿缺血的肌肉)。治疗3 周后分别对缺血对照组、MSCs移植组进行了血管造影、皮温测定、新生血管内 皮细胞数及毛细血管密度的测定。 结果：同种异体大鼠的骨髓间充质干细胞可在后肢缺血大鼠缺血肌肉组织内存 活、迁移、分化为血管内皮细胞形成新生血管；血管造影发现MSCs移植组治疗 后侧枝循环明显增加。下肢皮温测定发现缺血的左下肢同正常的右下肢之间的温 VS 差，治疗组均较缺血对照组显著降低，(2．66±O．171．04±0．23，PO．05)。 镜下每高倍视野中新生血管内皮细胞及毛细血管密度计数治疗组均较缺血对照 VS460．65 组增加。(50．5±4．5VS18．5±2．3，PO．05)．(1056．5±12．4 ±7．45，PO．05) 结论：纯化的MSCs可在缺血的大鼠骨骼肌内存活、定居、分化为血管内皮细胞， 促进侧枝循环形成，改善缺血下肢皮温，提示MSCs移植具有治疗性血管生成作 用。 第二部分低频阈下电刺激对缺血后肢VEGF和nngio—l表达的影响 目的：研究电刺激对后肢缺血大鼠VEGF及Angio～l表达的调节作用。评价电刺 激的治疗性血管生成作用及治疗下肢慢性缺血的效果。 方法： 血模型再随机分成2组：A缺血对照组，B电刺激组：大鼠股动脉切断后7天， 于大腿缺血的肌肉插入带有针灸针的电极，强度0．Iv，频率30Hz(低于肌肉收 缩强度)，每天2小时持续3周。治疗3周后用免疫组化方法检测电刺激对于后 肢缺血大鼠VEGF及Anglo一1表达的影响，再分别对缺血对照组、电刺激组进行 了新生血管内皮细胞数及毛细血管密度的测定。 结果：后肢缺血大鼠经电刺激后VEGF及Angio—I的表达均较非电刺激组明显增 VS VS 加(0．48±0．060．28±0．07，P0．05)，(0．58±0．030．3±0．05，P 0．05)，镜下每高倍视野中新生血管内皮细胞及毛细血管密度计数治疗组均较非 同种异体大鼠骨瞎闯充质干细胞移植联合电刺激治疗大寓下皎慢性缺血的实验研究 VS VS 电刺激组增加。(36．7±5．4 460．65±7．45。PO．05)。 结论：阈下电刺激能增加缺血大鼠骨骼肌中内皮细胞数、新生血管数、改善缺血 下肢皮温，提示阈下电刺激本身有治疗性血管生成作用，且这种作用是通过促进 后肢缺血大鼠骨骼肌内VEGF及Angio一1的表达来实现。 第三部分同种异体问充质干细胞移植联合电刺激对慢性下肢缺血的治疗性血 管生成作用研究 目的：评价同种异体骨髓间充质干细胞移植联合电刺激的治疗性血管生成作用及 治疗下肢慢性缺血的效果。 分成4组：A缺血对照组，BMSCs移植组：大鼠股动脉切断后7天接受同种异 u1，分6点注入大腿缺血的肌肉)，C电刺 体MSCs移植治疗(5×106MSCs／100 激组：大鼠股动脉切断后7天，于大腿缺血的肌肉插入带有针灸针的电极，强度 MSCs移植+电 0．1v，频率30Hz(低于肌肉收缩强度)，每天2小时持续3周，D 刺激组。治疗3周后分别对缺血对照组、电刺激组、MSCs移植组、MSCs移植+ 电刺激组进行了血管造影、皮温测定、新生血管内皮细胞数及毛细血管密度的测 定。 结果：血管造影发现MSCs移植联合电刺激组治疗后侧枝循环明显增加。下肢皮