芳香烃受体核易位蛋白ARNT2对肝癌增殖的影响及机制的分析.pdf

ARNT2对肝癌增殖的影响及其机制研究 中文摘要 中文摘要 原发性肝细胞癌(肝癌)是我国常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率均位列 恶性肿瘤第二位。肝癌的高侵袭、易复发和高转移特征已成为制约患者长期生存 改善的瓶颈。探索肝癌转移机制、寻找新的干预手段是从事肝癌临床和基础研究 工作者不得不面临和克服的一大挑战。 前期的研究结果发现，芳香烃受体核易位蛋白ARNT可以抑制肝癌增殖， 而与ARNT具有高度同源序列的ARNT2在肝癌中的作用报道甚少。本研究首先 观察ARNT2在肝癌和癌旁组织中的表达与肝癌患者术后预后的关系；然后探讨 ARNT2表达改变对肝癌生长的影响：最后进一步明确ARNT2调控肝癌增殖的 分子机制。 第一部分 芳香烃受体核易蛋白ARNT2在在肝癌组织中的表达及其与预后的关系 目的：比较ARNT2在肝癌及相应癌旁组织中的表达差异，分析ARNT2在原发性 肝癌中的表达与原发性肝癌预后的关系。 方法：应用组织微阵列技术和免疫组织化学染色方法，回顾性研究195例行手术 切除并经病理学证实的肝细胞癌标本(癌和癌旁组织)中ARNT2的表达情况， Log—rank法比较肝癌中不同AI矾T2表达组间生存率和复发率的差别，COX回归模 型进行单因素、多因素分析各有关因素对患者生存率和复发率的影响。 结果：免疫组化显示ARNT2主要表达在胞质，肝癌和癌旁的表达量分别为 同时，ARNT2的表达与患者的生存和复发显著相关，高表达组患者的总体生存 率显著高于低表达组，复发率显著低于低表达组(分别p0．001和旷0．004)。 COX回归模型单因素分析发现肿瘤大小、TNM分期、癌栓和癌内ARNT2表达 是影响肝癌患者总体生存的相关因素，而且肿瘤大小、TNM分期、癌栓、AFP 的水平和癌内ARNT2表达与肿瘤复发相关；多因素分析则发现癌内ARNT2表 达是影响肝癌患者预后的独立保护因素。 结论：ARNT2在肝癌的预后中发挥了重要的作用，癌内ARNT2高表达是影响 ARNT2对肝癌增殖的影响及其机制研究 中文摘要 肝癌预后的保护性因素。 第二部分芳香烃受体核易位蛋白ARNT2表达改变对肝癌增殖以及侵袭能力的 影响 目的：明确ARNT2表达对实验性肝癌增殖以及侵袭能力影响。 Western 小室检测细胞的迁移和侵袭能力变化。同时将转染后的细胞接种于裸鼠体内，研 究ARNT2表达改变后，裸鼠体内肝癌生长速度的改变。 ARNT20x转染 结果：靶向Amt2的重组慢病毒载体pLentiARNT2i和pLenti 细胞侵袭和运动能力较对照组明显减弱；体内实验结果显示ARNT2低表达组肿 瘤生长加快，ARNT2高表达组肿瘤生长明显减缓。 结论：ARNT2与肝癌的生长增殖呈负相关，具有抑制肝癌生长与增殖的作用。 第三部分ARNT2抑制肝癌增殖的机制研究 目的：探讨ARNT2抑制肝癌增殖的分子机制。 方法：用Illumina’SSolexa测序法检测m讯T2表达改变后，基因转录组的变化。 三组中差异表达。 殖。 关键词： 芳香烃受体核易位蛋白2；肝细胞癌；增殖；预后 functionsofARNT2onthe and of The proliferation biological growth carcinoma Hepatocellular is oneofthemostcommon tumors，and ca