二十碳五烯酸联视黄酸对HL-60细胞增殖与分化功能的影响及机制研究.pdfVIP

二十碳五烯酸联合视黄酸对HL．60细胞增殖 与分化功能的影响及机制研究+ 摘 要 acid，RA 是具有生物活性的维生素A衍生物，早已用 视黄酸 retinoic 于临床抗肿瘤治疗，尤其是急性早幼粒细胞性白血病 Acutepromyelocyte leukemia．APL 的诱导分化治疗，但RA治疗所产生的毒副作用、完全缓解 后易复发和耐药等缺点，使其应用受到限制。二十碳五烯酸 Eicosap· entaenoie fatty polyunsaturated acid，EPA 是一种n．3多不饱和脂肪酸 n一3 acid．n．3 PUFA ，许多实验证明，EPA亦具有抗肿瘤作用。本实验以HL- 60细胞株为研究对象，全反式视黄酸 ATRA 和EPA为处理因素，采用流 式细胞分析 FCM 和MTT比色法测定细胞增殖功能和凋亡情况，NBT还 原反应鉴定细胞分化，高效液相色谱法 HPLC 分析RA代谢，运用RT· 合RA对HL．60细胞增殖、分化和凋亡的影响及机制，为APL等白血病治 疗的新途径提供实验与理论依据。 实验结果表明： 1 EPA可抑制HL．60 细胞增殖并诱导其分化和凋亡，与RA联合应用则可明显增强HL．60细胞 的增殖抑制、分化和凋亡效应； 2 EPA可减缓HL．60细胞中RA代谢，并 下调RA诱导的代谢相关基因CRABPII mRNA表达； 3 EPA或RA单独 作用，可下调HL．60细胞中N．ras a 白以及诱导RARmRNA表达，而二者联合应用则可增强这些效应； 4 EPA不影响HL．60细胞中RB mRNA与pRB的表达，但与RA联合应 用可增加RA对它们表达的下调效应。同时，EPA和RA单独及联合应用 本课履受田家自然科学基金资助 No．座机电话号码 均可增加pRB的去磷酸化率。 上述结果提示：EPA通过下调RA诱导的代谢相关基因CRABPII等的 a、N． 表达而减缓HL．60细胞内RA代谢，以及影响HL．60细胞中RAR l／ 胞增殖与分化功能的重要机制。 ／ 关键词：二十碳五烯酸 视黄酸HL．60细胞细胞增殖 细胞分化 细胞凋亡 Acid andRetinoic of acid Effects Eicosapentaenoic Cells HL-60 of Differentiation and onProliferation Mechanisms andthe Abstract acute inthe of Retinoic beenused therapy acid RA has promyelocyte 1990s．Ithasbeen thatAPLcanachieve leukemia APL sinceproved remission complete byRA especially the and resistancetoRAafterbrief show remission．Therefore， alwaysrelapse RA seriesof have itis totake to studies necessarywaysimprovetherapy．A demonstrated kindofn-3 acid EPA ，a polyunsaturated eicosapentaenoic effects antitumor．Inthis acids，hasmanyimportantbiologicincluding fatty effectsofall-trans thatthe EPAon wasstudied RA ATRA and paper,it ofHL一60cellsandthe anddifferemiation corresponding proliferation MTT used mechanisms．First．flowand were to the cytometry assay and ofHL-60 celldifferentiationwas proliferationapoptosis cells，and evaluatedNBTreduction by experiment．Then，highperformanceliquid RA takento metabolisminHL一60 analyse cells， chromatography HPLC was reverse chain the transcriptionpolymerase estimate reaction RT-PCR to mRNA of CRABPII，RARa，and expression RB．Add