葡萄穗霉木聚糖酶XYA6205在黑曲霉中的表达及其酶学特性分析.pdfVIP

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2013 2 葡萄穗霉木聚糖酶 XYA6205 在黑曲霉中的表达及 酶学特性分析 1,2 2 2 1 王红霞   王华明  张大龙  罗成 (1. 天津科技大学食品工程与生物技术学院 食品营养与安全教育部重点实验室,天津 300457 ; 2. 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308) 摘 要 : 木聚糖酶是涉及半纤维素水解的主要酶,具有重要的应用价值。将葡萄穗霉上可能为木聚糖酶的基因xya6205 (含 信号肽)克隆到载体pGm 上,进而通过原生质体-PEG 转化到黑曲霉G1 上。得到的目的转化子经过摇瓶培养发酵,SDS分 析表明,产生了大小为20 kD 左右的蛋白条带。DNS 法测定1 L 发酵液5 d 酶活,比活达392 U/mg ,其最适温度为50 ℃,最适pH 为5.8 ,在不同pH 缓冲液中处理18 h 后,最高仍有83% 残余酶活。 关键词 : 木聚糖酶 黑曲霉 克隆 酶活 葡萄穗霉 Heterologous Expression and Characterization of Xylanase XYA6205 from Stachybotrys chartarum 1,2 2 2 1 Wang Hongxia Wang Huaming Zhang Dalong Luo Cheng (1. Key Laboratory of Food Nutrition and Saf ety, Tianj in University of Science and Technology, Ministry of Education, School of Food Engineering and Biotechnology, Tianj in University of Science and Technology, Tianj in 300457 ;2. Tianj in Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Science, Tianj in 300308 ) Abstract:  Xylanase, the main enzyme to hydrolysis hemicellulose, has important application in industry. In this study, a gene xya6205 (with signal peptide )from Stachybotrys chartarum was inserted to an expression vector, eventually an recombinant plasmid pGm-xya6205 was constructed, and then transformed into A. niger G1 mediated by PEG4000. The transformants were

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