津优力对大鼠心肌梗塞的治疗作用研究.pdfVIP

全国第三届心脑血管疾病学术会议论文集 津优力对大鼠心肌梗塞的治疗作用研究 李连达，张荣利，张旋1，吴理茂，宁可永，李贻奎，何君，胡箫1 中国中医研究院西苑医院基础室，北京100091；1格兰百克生物制药有限公司，济南250014， 山东 摘要 目的：研究津优力对大鼠实验性心肌梗塞的治疗作用。方法：应用冠状动脉结扎心肌梗塞模 型，通过心肌梗塞面积的定量组织学测定、心肌酶学检查‘心肌小血管密度及心肌免疫组化染色等 观测指标，评价给予津优力24小时和2周后的治疗作甩。结果：津优力给药1次及给药2周后， 心肌梗塞范围减小，降低心肌酶CK、LDH，心肌梗塞治疗2周后，在心肌梗塞区及交界区有CD34 阳性染色细胞的存在；心肌小血管的密度增加。结论：津优力对心肌梗塞有明确的治疗作用。津优 力可动员骨髓干细胞至外周血，自动耙向移植于受损心肌，分化为心肌细胞补充心肌细胞数量；心 肌小血管密度增加改善心肌供血，并可降低心肌酶，从而发挥综合的治疗作用。 关键词津优力；心肌梗塞；骨髓干细胞；心肌细胞 冠心病发病率高，社会危害大，近年在药物疗法，介入疗法及手术疗法等方面，均已取得重大 进展，但仍有一些问题需要进一步解决。例如心肌缺血性损伤、甚至坏死，使心肌细胞数量减少、 心功能受损，而成熟心肌细胞又无再生能力，如何促进心肌细胞新生，补充和增加心肌细胞数量、 修复损伤心肌，改善心功能，需要进一步研究解决；又如介入疗法及手术疗法可使心肌大血管恢复 供血，但都无法增加心肌小血管数量，如何改善心肌微循环，增加心肌供血，这也是有待解决的问 题。最新研究成果表明，干细胞移植治疗冠心病可解决这两方面问题，但干细胞移植目前还处于实 验研究阶段，技术不够成熟，还有很多问题需要进一步解决。本研究旨在探讨津优力对大鼠冠脉结 扎心肌梗塞的治疗作用，以改进干细胞移植技术，使之简便易行、安全有效、简化操作，便于临床 推广应用。初步研究结果表明，津优力可激活并动员骨髓干细胞进入血液循环，自动靶向移植于心 脏，从而对心肌梗塞产生明显治疗作用。 l材料与方法 (2000)第010号)。 glycol 1．2药品与试剂 津优力(聚乙二醇重组人粒细胞集落刺激因子。polyethyene recombinanthuman granulocytecolonystimulating 和即用型SABC试剂盒，购自博士德生物工程有限公司。盐酸地尔硫卓注射剂：天津田边制药有限 试剂盒：北京福瑞生物工程公司，批号：0301。硝基四氮唑蓝(N—BT)，购自解放军军事医学科学 120。 院药材供应站，批号：971 1．3主要仪器多道生理记录仪，RM一6100型，日本光电公司产。多媒体彩色病理图像分析系统， 析仪：RA一1000，美国。 1．4大鼠心肌梗塞造模方法3．5％水合氯醛按lOml／kg体重麻醉，接呼吸机，打开胸腔，暴露心 脏，结扎冠状动脉左前降支根部，关闭胸腔，缝合皮肤，局部应用青霉素8万单位以预防感染。 1．5动物分组24小时实验：随机分为模型对照组，8只，生理盐水0．2ml／kg；津优力高剂量组， 全国第三届心脑血管疾病学术会议论文集 均为皮下注射，24小时后处死动物，观测结果。2周实验：随机分为模型对照组，10只，生理盐 药1次，均为皮下注射，以后每日给药1次，第14日处死动物，观测结果。 1．6观测指标心电图：于实验前、结扎后15分钟、30分钟，做标准导联Ⅱ心电图。心肌酶：于 处死前腹主动脉取血测CK、LDH。心肌梗塞范围测定(N—BT染色法)：动物处死后，立即取下心 脏，生理盐水冲冼，用滤纸吸去水分，称重，在结扎线以下，从心尖起平行切成等厚五片，分别称 重，置于硝基四氮唑蓝染液中，常温避光2分钟，用多媒体彩色病理图像分析系统测量每个切片的 面积、心肌梗塞面积(N-BT非染色区)，计算心室肌总面积、心室肌梗塞总面积、心室肌梗塞总重 量，分别算出心肌梗塞面积／心室面积(％)、心肌梗塞重量／心脏重量(％)。心肌小血管密度：取梗塞 心肌与正常心肌的交界区心肌，10％甲醛固定液固定，石蜡包埋，59m病理切片，HE染色，于光 镜下计算心肌小血管密度等。心肌免疫组织化学染色：采用SABC法，各组均设阴性对照，以 0。01mollLPBS液代