DAN的生物合成复制.ppt

二、参与复制的要素 （一）DNA聚合酶 （二）双链DNA解链、解旋酶类 （三）引物酶 （四）连接酶 复制叉动画 DNA复制过程动画 逆转录病毒 切除修复 是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 ATP E.coli的切除修复机制 * 第十章 DNA的生物合成 北大医学部生化系 陈颢 DNA 生物合成 1、DNA复制 2、DNA损伤的修复 3、逆转录 第一节 DNA的复制 DNA复制( DNA replication) 在细胞分裂过程中,以亲代DNA为模板合成子代DNA分子的过程。 复制 亲代DNA 子代DNA 一、 DNA复制的方式 DNA的半保留复制 semiconservertive replication DNA的半保留复制 亲代DNA 复制过程中 形成的复制叉 子代DNA A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G T C C A T G A C T C C A T G A C A G G T A C T G A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 半保留复制的意义 子代DNA保留了亲代DNA的全部遗传信息，体现了遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础 遗传的保守性并不是绝对的 三 、复制的过程 （一）复制的起始 （二）复制的延长 （三）复制的终止 DNA螺旋的构象变化和解链 参与松弛螺旋、解链的酶、蛋白质主要包括： 拓扑异构酶 解链酶 DNA单链结合蛋白 1. DNA解链酶 功能：消耗ATP，作用于氢键， 解开DNA双链 特点：解链沿复制叉行进方向 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 解链酶 2. 拓扑异构酶 定义： 能催化DNA拓扑异构体互变的一类酶称为拓扑异构酶 分类： 拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ 功能： 拓扑异构酶既能水解、又能连接磷酸二酯键 A B C DNA分子拓扑异构体 3.单链结合蛋白 功能：在复制中维持模板处于单链状态 保护复制新生单链的完整性 DNA复制的起始点 1.原核生物通常只有一个 ori 245bp E.Coli 4×106bp E.coli 2.真核生物每个染色体有多个 5’ 3’ ori ori ori ori 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 复制叉（replication fork） 复制方向 （一） 起始与引物RNA合成 引物酶 催化NTP聚合 引物 RNA短片段，与模板DNA互补 方向 5’ 3’ 长度 十余个至数十个 引物 由引物酶催化合成的短链RNA分子 5? 3? 5? 3? 引物 HO 引物酶 3’ SSB 5’ 解链酶 在DNA-pol催化下，dNTP 逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 （二） 延长阶段 催化DNA链延长的酶 DNA聚合酶 底物: dATP, dGTP, dCTP, dTTP DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 简称：DNA-pol 活性：1. 5??3? 聚合活性 2. 3’?5’ 外切酶活性 3. 5??3? 外切酶活性 聚合反应 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 聚合反应的特点 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行 DNA新链生成需引物和模板 DNA的半不连续复制 在DNA复制过程中，一条链 是连续合成的，而另一条链 是不连续合成的 5’ 3’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 5’ 前导链 连续合成，方向与复制叉一致 不连续合成，方向与复制叉相反 随从链 冈崎片段 3’ 原核细胞 1000-2000bp 真核细胞 100-200 bp 冈崎片段 RNA引物水解和完整DNA分子形成 （三）复制的终止 5? 5? 5? RNA酶 OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP