基因工程第九章重组DNA导入细胞分析.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 第九章 重组DNA导入细胞 Transferring DNA to cells 转化 转导 转染 感染 结合 其它 一、转化 transformation 一种遗传转移方式 1928年 Griffith 首次发现 肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae） 少量无毒RII（无荚膜，粗糙） 大量杀死有毒SIII（有荚膜，光滑） 混合注射小白鼠 ?小鼠死亡?可分离出活SIII细胞 RII细胞 + SIII DNA 即一来自一个细菌细胞(供体)的DNA(片段)被另一个细胞(受体)所吸收(随后同受体染色体一起进行重组) 对DNA的吸收，仅在受体生长周期中的一个短暂阶段。能够吸收DNA的细胞，称作感受态细胞(competent cell) 肺炎链球菌产生的感受态因子能将感受态授于同一菌株的非感受态，而枯草芽胞杆菌的感受态因子似乎不能将感受态传给非感受态细胞。感受态因子可能是一种自溶酶(autolytic enzyme)，它能够产生或暴露结合DNA的受体位点 感受态的确定似乎涉及某些胞内蛋白质的合成 在肺炎链球菌和流感嗜血杆菌中，在最大感受态时期，群体中感受态细胞可达100%。 在B. subtilis中感受态细胞的比例似乎不超过10-15% 在转化中有功