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一、怎样进行酵母菌的计数? 提示:对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法,用到血球计数板。 * 探究: 培养液中酵母菌 种群数量的变化 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素 1、酵母菌的繁殖方式主要是: 2、酵母菌的呼吸方式是: 兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸) 回顾思考: 出芽生殖 3、酵母菌的培养条件要注意那些问题? 比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。 例如:酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈“S” 型增长。温度、养分会影响酵母菌的生长。 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 问题??? 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?温度会影响酵母菌的生长吗?营养成分会影响酵母菌的生长吗? 作出假设 根据前面所学的知识,针对这一问题作出假设: 讨论探究思路 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板(2mm×2mm方格)、滴管、显微镜等,都由老师提供。 在制订计划前,你需要思考以下问题,并与同学讨论。 介绍:血球计数板的构造 1、血球计数板:可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台,中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网。 化 放大后的方格网计数室 I H G F E D C B A 25×16 16×25 2、方格网的构成: 方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,计数室通常有两种规格:一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。 3、使用方法: 将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片,将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内,加盖盖玻片。 5、单位换算: 以1mm×1mm为例,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3,换算为mL,则0.1mm3=10-4mL 。 4、计数室的规格: 计数室长×宽有: 1mm×1mm, 2mm×2mm, 3mm×3mm等 深度均为0.1mm。 如果使用规格为16格×25格的计数室,要按对角方位,取左上、右上、左下、右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数。 如果使用规格为25格×16格的计数室,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数(五点取样法)。 出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。 6、如何计数呢? 规格为25格×16格的计数室,五点取样法 7、盖玻片下的培养液厚度为0.1mm,请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数,换算成1ml培养液中酵母菌总数的公式。 每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式 (以大方格1mm×1mm为例): 酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)×400 /10-4 ×稀释倍数 即:一小方格内酵母菌个数× 4× 106×稀释倍数 课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm, 则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(2mm× 2mm ) : 25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)×400/ 4X10-4 ×稀释倍数 即:一小方格内酵母菌个数×106×稀释倍数 其体积为0.4mm3,换算mL则0.4mm3=4X10-4mL。 使酵母菌混合均匀。 不需要,因不同时间取样已形成对照。 需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。 二、从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么? 三、本探究需
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