舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与PI3K―Akt通路的关系.docVIP

舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与PI3K―Akt通路的关系 　　【摘要】 目的：研究舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）通路的关系。方法：健康雄性SD大鼠24只，体重180～200 g，采用随机数字表法将其随机分为四组（n=6）：非糖尿病假手术组（NDM-S组）、非糖尿病缺血再灌注组（NDM-I/R组）、非糖尿病舒芬太尼后处理组（NDM-SP组）、非糖尿病舒芬太尼后处理+渥曼青霉素（PI3K抑制剂）组（NDM-SP+W组）。另取健康雄性SD大鼠，采用高糖高脂饮食喂养6周诱导胰岛素抵抗+腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg的方法制备2型糖尿病模型（血糖≥16.7 mmol/L），选取造模成功的大鼠24只，继续高糖高脂喂养2周后采取随机数字表法，将其分为四组（n=6）：糖尿病假手术组（DM-S组）、糖尿病缺血再灌注组（DM-I/R组）、糖尿病舒芬太尼后处理组（DM-SP组）、糖尿病舒芬太尼后处理+渥曼青霉素组（DM-SP+W组）。采用左冠状动脉前降支下穿线或结扎，阻断30 min，再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注的模型。其中假手术组只穿线不结扎；缺血再灌注组穿线后稳定5 min，阻断30 min，再灌注120 min；舒芬太尼后处理组于再灌注前5 min经舌下静脉注射舒芬太尼1.0 μg/kg；舒芬太尼后处理+渥曼青霉素组于再灌注前5 min经舌下静脉注射渥曼青霉素15 μg/kg和舒芬太尼1.0 μg/kg。再灌注120 min后取血样，测定肌钙蛋白cTnI的浓度；处死后收集心肌组织，采用TUNEL法测定心肌细胞的凋亡指数（AI），采用Western blot法检测心肌组织Akt、p-Akt的表达水平。结果：非糖尿病和糖尿病大鼠I/R组、SP组、SP+W组与S组相比较，血浆cTnI的浓度升高、AI增加、p-Akt的表达增加（P0.05）。舒芬太尼后处理可明显减轻NDM组的心肌缺血再灌注损伤，使升高的cTnI浓度降低、AI降低、p-Akt的表达增加（P0.05），而对DM组心肌缺血再灌注损伤的各项指标均无明显的影响。NDM-SP组的血浆cTnI的浓度、AI明显低于DM-SP组而p-Akt的表达高于DM-SP组。结论：舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤没有保护作用，PI3K-Akt通路不参与该过程。 　　【关键词】 舒芬太尼后处理； 2型糖尿病； 心肌缺血再灌注损伤； PI3K-Akt 　　【Abstract】 Objective：To investigate the effect on type Ⅱ diabetes mellitus of the myocardial ischemia-reperfusion injury by sufentanil postconditioning in rats and its relation with PI3K-Akt. Method：24 healthy male SD rats weighing from 180-200 g were randomly divided into 4 groups by random number table method （n=6）： nondiabetic mellitus sham operation group （NDM-S group）， nondiabetic mellitus ischemia-reperfusion group （NDM-I/R group）， nondiabetic mellitus sufentanil postconditioning group （NDM-SP group） and nondiabetic mellitus sufentanil postconditioning + wortmannin （PI3K-inhibitor） group （NDM-SP+W group）. More healthy male SD rats were made into T2DM model （Glucose≥16.7 mmol/L） by the following method： feeding them with high-sugar and high-fat diet for 6 weeks to induce insulin resistance and giving intraperitoneal injection of streptozotocin with the dosage of 35 mg/kg. Selected 24 rats that were