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不同提取方法对香菇多糖得率影响的研究 摘 要 比较了不同提取方法对香菇多糖得率的影响。结果表明，以0.4mol/l的盐酸为浸提液提取未纯化的香菇多糖，提取率为24%，0.8mol/L NaOH为浸提液提取的未纯化的香菇多糖，提取率为15.58%，较热水提法提取率7.56%有大量提高，而其活性则有待进一步研究。 关键词 提取方法 香菇多糖 苯酚硫酸法 提取率 中图分类号：Q539 文献标识码：A DOI：10.16400/j.cnki.kjdkz.2015.06.029 The Study of Extration Effect on Lentinan by Different Extration Methods ZHANG Rui， ZENG Wanyong， GUO Huanzhong， LI Jinhua （School of Biology and Pharmaceutical Engineering， Wuhan Polytechnic University， Wuhan， Hubei 430023） Abstract Different extraction methods for leninan contents were compared. The results show that the raw extration rate reaches 24% by 0.4mol/l of hydrochloric acid， while it is 15.58% by 0.8mol/l of NaOH. Both of the methods are far better than hot water extration method， which is 7.56% in the study. The activity of the extrations should be investigated futhermore. Key words extraction method; Lentinan; PhenolSulphate colorimetry; rate of extraction 香菇（Lentinus edodes）是一种集营养、保健和药用功效于一体的可直接利用的药食两用菌类，广泛地分布于我国各省区，在我国有悠久的食用历史。香菇中含多种活性成分，其中香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、降血糖等生物活性，是非特异免疫刺激剂，并且在临床上得到广泛应用。① 大量工作证明香菇多糖能增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力，提高机体抗肿瘤功能且无毒副作用，是理想的免疫促进剂。香菇多糖的抗肿瘤活性与分子量有关，而且其硫酸酯化合物具有抑制爱滋病毒的作用。②林桂兰等对香菇多糖抗食用油脂的氧化作用、清除羟基自由基的作用、清除超氧阴离子自由基的作用以及在模拟胃液条件下清除的作用进行了研究，结果表明，香菇多糖提取物具有体外抗氧化性能（林桂兰等，2006）。 香菇多糖的提取方法一直是研究的热点。前人采用了高压热水浸提法、③超声波分步酶解法④等提取香菇多糖。本实验以神农架产香菇为材料，比较了不同提取方法对香菇多糖得率的影响。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 实验材料 干香菇购自神农架。 蛋白酶K为Merck公司产品;无水酒精，浓盐酸，氢氧化钠，苯酚，浓硫酸，正丁醇，氯仿，30%双氧水，磷酸二氢钠，磷酸氢二钠，氯化钠，铁氰化钾，三氯乙酸，六水氯化铁，三羟甲基氨基甲烷，邻苯三酚，七水硫酸亚铁，水杨酸等，以上试剂均为分析纯。 1.2 香菇多糖的提取 1.2.1 香菇粉的制备 将干香菇在烘箱内80℃烘干至恒重，粉碎机磨碎成粉，过60目筛，备用。 1.2.2 香菇多糖提取 （1）热水浸提法：⑤取香菇粉10g于锥形瓶，加入200ml蒸馏水，在80℃恒温水浴上回流浸提2h。用滤布过滤，分离滤液和残渣（滤渣在水中反复浸取2次，最后合并滤液）;合并滤液，以3000r/min离心20min。取部分上清液，稀释60倍，用苯酚硫酸法测多糖浓度。⑥ （2）酸浸提法：分别取香菇粉10g于5个锥形瓶中，水浴加热温度为80℃，冷凝回流，料液比1：20，按照盐酸浓度0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L加热2h。后续步骤同（1）。 （3）碱浸提法：分别取香菇粉10g于5个锥形瓶中，水浴加热温度为80℃，冷凝回流，料液比1：20，按照氢氧化钠溶液浓度0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mol/L加热2h。后续步骤同（1）。 1.2.3 香菇多糖的分离、纯化 取香菇粉10g于锥形瓶，加入200ml蒸馏水，在80℃恒温水浴上回流浸提2h。用滤布过滤，分离滤液和残渣（滤渣在水中反复浸取2次，最后合并滤液）;合并滤液，以3000r/min离心20min。收集全部上清液，经蛋白酶k