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头孢噻肟钠相关物质高效液相色谱分析 摘 要：头孢噻肟钠是一种运用范围广泛的抗生素，它的抗菌谱广。在临床医学中的作用有治疗没出现并发症的急性尿路感染，和尚未发生并发症的肺炎链球菌。然而在我国的药典中对于有关的物质检测，并没有相应的记录。本文借助高效液相色谱法，进一步分析和研究头孢噻肟钠相关物质。 关键词：头孢噻肟钠；高效液相色谱法；相关物质；分析 人们通常会使用高效液相色谱法来做医学和其他专业方面的试验。高效液相色谱法会把液体当做流动相，这是一种高压输液体系。具体的是将溶液或者混合溶液倒进色谱柱中，当溶液在柱中实现分离后，会自主流到检测器皿内，进行各种检测，因此可以展开分析试样的工作。当前，我国对高效液相色谱法的运用在逐渐地变广，会涉及到不少领域，比如医学、工学等等。除此之外，高效液相色谱法还具备一定的优势。特别是他们的高效、高速、高压以及非常高的灵敏度，同时高效液相色谱法运用的领域很广泛。 同时，高效液相色谱法也存在一定的缺陷，其中最明显的是“柱外效应”，如果与气相色谱比较，其灵敏度较低。因此，为了更顺利的进行试验，有关人员一般都会同时利用高效液相色谱法与气相色谱法，使二者互相补充。本文主要是通过高效液相色谱法来进一步分析和研究头孢噻肟钠的相关物质。 1 仪器与试验 岛津2010高效液相色谱仪。头孢噻肟峰鉴定用标准品（含杂质A、B、C、E、F），由EPCRS提供。头孢噻肟对照品，由中国生物制品检定所提供。甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 色谱条件与系统适用性：研究者选择应用十八烷基硅烷键合硅胶充当填充剂，色谱柱则是3.9mm×150mm（5m）。流动相A：实验溶液是磷酸二氢钠溶液，浓度为7.1g/l，PH要求达到6.25。流动相B：甲醇（见表1） 表1流动相B：甲醇。流速1.0ml/min；检测波长235nm；进样量10μL；柱温30℃。 2 溶液调配 溶液A：流动相A：流动相B，B为14：86。 试验溶剂：运用精密、准确的仪器选取40mg的头孢噻肟钠，然后投入到规格为50ml的量瓶内，然后再倒入溶液A，使其充分溶解后稀释到规定的刻度。 对比溶剂（a）：运用精密、准确的仪器选取头孢噻肟钠约8mg，，作为对照品，然后将其投入到量瓶内，然后再倒入溶液A，使其充分溶解后稀释到规定的刻度。 对比溶剂（b）：运用精密、准确的仪器选取样品溶剂，1.0ml左右，然后将其投入到规格为100ml的量瓶内，然后再加入固定容量的溶液A，充分溶解后稀释到规定的刻度。 对比溶剂（c）：运用精密、准确的仪器选取样品试剂，4.0ml左右，然后将1.0ml的硒酸盐投入到样品试剂中，待其温度上升到40℃时，将溶液加热，加热时间为两个小时。之后在投入PH值为5ml的冲液和1.0ml容量的稀氢氧化钠溶液。如图1。 对比溶剂（d）：运用精密、准确的仪器选取头孢噻肟钠，明确是标准品。同时头孢噻肟钠中含有一定量的杂质（A、B、C、E、F），选择运用溶液A与头孢噻肟钠相互溶解，并需要稀释成5ml的溶液。如图2。 图2 3 方法 本次试验会将供试品溶剂对比溶剂（b）、和标准溶液（b）、对比溶剂（c）、对照溶液（d），分别投入到色谱柱内，然后将各种溶剂的色谱柱图做好记录。保留头孢噻肟峰的时间为13分钟左右。运用头孢噻肟峰来研究和鉴别标准品谱图，同时还需要通过头孢噻肟钠来分析对比溶剂（d），也需要应用头孢噻肟峰再对对照溶液（d）的色相谱图进行研究，来鉴别杂质A、B、C、E、F。头孢噻肟中含有杂质各有差异，杂质峰的保留时间也会有所不同。与头孢噻肟相比，各种杂质峰的保留时间需要具有一定的顺序规律。杂质B保留的时间应该为0.3min；杂质A保留的时间应该为0.5min；杂质E保留的时间应该为0.6min；杂质C保留的时间应该为1.9min；杂质D保留的时间应该为2.3min；杂质F保留的时间应该为2.4min；杂质G保留的时间应该为3.1min。 评价系统的适用性：本次试验会选取对比试剂（c），将它投入到液相色谱仪器内，然后记录下呈现的色谱图。头孢噻肟与杂质E峰之间的分离度大于3.5；头孢噻肟峰的对称因子不应该超过2.0。 4 结果与讨论 4.1 对于所含杂质数量的运算规则：在运算所含杂质数量的过程中，峰面积与对比溶剂（b）的主峰相比时，峰面积小于对比试剂（b）的主峰。而且，峰面积是对比试剂（b）的0.05倍。在这种情况下，统计数据的过程中完全可以忽略不计。 4.2 对于所含杂质的确定。本次试验按照检测的色谱图对测量出的杂质进行分析。不仅需要定性的分析，还需要定量的分析。已经测量出来的杂质包括A、B、C、D、E、F，它们都不能高于对比试剂（b）主峰面积的1%。而任何一种杂质，都不能高出对照溶液（b）主峰面积0.2%；所有杂质的总和不能高出对照溶液（B）主峰面积的3%。 4.3 试验