生物化学14讲课.pptVIP

* * 第十四章 核酸的物理化学性质 一、核酸的水解 二、核酸的酸碱性质 三、核酸的紫外吸收 四、核酸的变性、复性及杂交 一、核酸的水解 （一）酸水解 对酸的敏感性：糖苷键＞磷酸酯键 嘌呤糖苷键＞嘧啶糖苷键 脱嘌呤： pH1.6，37℃，对水透析 pH2.8，100℃，1h 脱嘧啶： 98-100%甲酸，175℃，2h 三氟乙酸，155℃，60min（DNA）或 80min（RNA） 利用酸水解可以研究核酸的碱基组成 （二）碱水解 RNA的磷酸酯键对碱敏感 室温，0.3～1mol/L KOH，24h，可将RNA完全水解，得到2′-或3′-核苷酸的混合物。 DNA抗碱水解 生理意义： DNA更稳定 ，遗传信息。 RNA是DNA的信使，完成任务后迅速降解。 （三）酶水解 非特异的磷酸二酯酶： 蛇毒磷酸二酯酶水解DNA（RNA）得5′-核苷酸 牛脾磷酸二酯酶水解DNA（RNA）得3′-核苷酸 特异的磷酸二酯酶： 核酸酶 1、核酸酶的分类 ★底物专一性： 核糖核酸酶 RNase 脱氧核糖核酸酶 DNase ★作用方式： 核酸外切酶（exonuclease)、核酸内切酶 (endonuclease) 单链核酸酶、双链核酸酶、杂链