ALDH1在乳腺UDH、ADH、IDC中的表达及意义.docVIP

ALDH1在乳腺UDH、ADH、IDC中的表达及意义 　　[摘要] 目的 探讨ALDH1在乳腺普通导管增生、非典型导管上皮增生以及浸润性导管癌中表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法对30例正常乳腺及90例乳腺导管疾病患者的ALDH1的表达进行测定。结果 ALDH1在正常、乳腺普通导管增生、不典型导管上皮增生以及浸润性导管癌中的阳性表达率为：0%、23.3%、23.3%、60%。结论 乳腺浸润性导管癌患者的ALDH1的阳性率明显高于正常乳腺及其它乳腺导管疾病，提示ALDH1的阳性表达与乳腺增生至乳腺癌变的演进，且与疾病的预后有一定的关系。 　　[关键词] 乳腺肿瘤；ALDH1；免疫组织化学 　　[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）04（c）-0011-03 　　乳腺导管疾病是全世界女性最常见的肿瘤之一，我国女性关于乳腺导管疾病的发病率近年来也一直呈现上升趋势[1-2]。乳腺癌作为乳腺常见的恶性肿瘤，严重影响了妇女的身心健康甚至危及生命，其中浸润性导管癌是最常见的类型。乙醛脱氢酶1（Aldehyde Dehydrogenase class 1，ALDH1）最早是通过对人类肝脏对酒精的解毒作用发现的，至2007年研究者[3]才首次通过对乳腺癌实体组织的研究，发现高表达ALDH1具有肿瘤干细胞特性，即具有较高的成瘤率，且预后较差，总体生存率也较低，但因其对于乳腺导管病变的作用机制目前尚未完全阐明，所以探讨ALDH1在乳腺导管病变进展中的意义就具有重要的理论和现实意义。为探讨ALDH1在乳腺普通导管增生、非典型导管上皮增生以及浸润性导管癌中表达及其临床意义，该研究选取 2007年1月―2008 年12月各类乳腺疾病石蜡切片共120例为研究对象，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　经山西医科大学附属长治市人民医院伦理委员会批准且患者本人知情同意，选取在山西医科大学附属长治市人民医院病理科就诊的各类乳腺疾病石蜡切片共120例，所有患者均为女性，年龄18～83岁，平均年龄（53±3.2）岁，术前均未接受化疗、放疗及其他辅助治疗。标本均由 10%中性甲醛固定，石蜡包埋，HE染色。每例乳腺病变的病理诊断均经过2名高年资病理医生的复查，诊断准确无误，按照WHO2012年乳腺病理分类，其中普通型导管增生（Usual ductal hyperplasia，UDH）、非典型导管上皮增生（Atypical ductal epithelial hyperplasia，ADH）以及浸润性导管癌（Infiltrative ductal carcinoma，IDC）石蜡切片均30例。 　　1.2 试剂及方法 　　兔抗人ALDH1单克隆抗体（EP1933Y，美国abcam公司，北京中杉金桥生物技术有限公司代购），实验浓度 1：200；SP超敏检测试剂盒；DAB显色试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司）；柠檬酸组织抗原修复液（福州迈新生物技术开发有限公司）；PBS缓冲液（福州迈新生物技术开发有限公司）；3%H2O2。 　　将120例烤好的石蜡组织切片常规脱蜡至水；高压锅柠檬酸抗原修复液热修复后，待水温自然降至室温，PBS冲洗3次×5 min，除去PBS；3%过氧化氢（阻断剂）室温湿盒孵育10 min，PBS冲洗3次×5 min，除去PBS；10%正常山羊血清室温湿盒封闭10 min；加入一抗ALDH1 4℃过夜，PBS冲洗3次×5 min，除去PBS；加入二抗室温湿盒10 min；PBS冲洗3次×5 min，除去PBS；DAB显色适当时间（镜下掌握）。 PBS返蓝；苏木素复染2 min；乙醇由低向高梯度脱水、二甲苯透明；中性树胶封片。 　　1.3 结果判断 　　ALDH1阳性颗粒主要分布于细胞浆，按照许良中等[4]的方法，采用阳性染色强度及阳性细胞所占百分比共同进行判断。每张切片在400倍视野下随机选择10个视野，将切片中平均阳性细胞比例及染色深浅分别计0～3分，染色强度以多数细胞为准：无着色，0分；淡黄色，1分；黄或深黄色，2分；褐或棕褐色，3分。切片中无阳性细胞，0分；阳性细胞75%，4分。两项指标的总积分将结果分为4级，0～3分为（-）；4～5分为（+）；6～7分为（++）；8分以上为（+++）；其中0～3分视为阴性表达，（+）（+++）视为阳性表达。 　　1.4 统计方法 　　采用SPSS 17.0统计学软件进行分析，计数数据采用χ2检验或者Fish′s精确检验。 　　2 结果 　　2.1 ALDH1在乳腺UDH、ADH、IDC的表达情况 　　120例患者ALDH1在正常乳腺、UDH、ADH、IDC的阳性率分别为：0%、23.3%、23.