- 1、本文档共39页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
艾滋病检测原理和技术规范课件讲义
HIV待确证样品 HIV阳性确证报告原件 感染者 确认报告原件 确认报告复印件备案 筛查实验室所在单位 筛查实验室所在单位 确证实验室 筛查实验室 艾滋病样本确证、报告流程: * * 认真填写各类表格(最好能打印),及时上报。 * * 艾滋病检测原理和技术规范 * * * * 一、艾滋病与艾滋病病毒 * * (有A~E多个亚型) 与一种感染灰身白脸猴的猴免疫缺陷病毒(SIV)相似。 HIV-1 HIV-2 Human immunodeficiency virus HIV (有A~J,O1~O4 多个亚型) 与一种感染黑猩猩的猴免疫缺陷病毒(SIV)相似。 * * 艾滋病病毒感染后,可严重破坏人体的免疫系统,使人体丧失抵御各种疾病的能力,有利于各种病原体的侵入,从而导致各种严重的、难以治愈的机会性感染或肿瘤,最终导致死亡,病死率可达100%。 * * HIV-1 M组 HIV-1 O组 HIV-2 非洲中部和东部 美国、欧洲、南美洲、非洲和亚洲 南美洲、印度、赞比亚、中国 非洲中部和东部 泰国、中非、印度 巴西、罗马尼亚、喀麦隆 加蓬、苏联、尼日利亚、乌干达、塞内加尔、赞比亚 喀麦隆、扎伊尔、中非 塞浦路斯 扎伊尔 喀麦隆、加蓬 HIV型别和亚型的 分类进化与地区分布: 西非、印度 HIV A B C D E F G H I J O1 O2 O3 O4 A B C D E * * 基因亚型与感染途径的关系 * * 感染分期 临床分期 维持时间 感染标志物 传染性 原发感染 潜伏期 潜伏期 2-4周 抗体阴性 (窗口期) 传染 危险性高 原发感染 症状期 急性 HIV感染 1-2周 传染 危险性高 慢性感染 潜伏期 无症状 HIV感染 2-15年 (平均 8-10 年) 抗体阳性 有传染性 临床 发病期 艾滋病 0-3年 (平均 1-2 年) 抗体阳性 抗原阳性 传染性强 艾滋病从感染到发病的一般过程 * * 二、艾滋病检测的原理及方法 * * 临床诊断 感染监测 耐药监测 治疗评价 干预评估 抗体检测 抗体检测 核酸定性 CD4检测 新感染检测 CD4检测 核酸定量 核酸定量 病毒分离 基因测序 核酸定性 核酸定量 各种检测技术为艾滋病防治工作 提供广泛的技术支持平台 * * 检验标志物 检验目的 检 验 方 法 HIV(1+2) 抗体 筛查试验 金标法、硒标法 快速诊断试验 明胶颗粒凝集试验(PA) 微孔板法 酶联免疫试验 (ELISA) 第三代:双抗原夹心法 第四代:增加检测P24抗原 确证试验 蛋白印迹法(WB) 手工/仪器 病毒抗原 早期诊断 酶联免疫试验 检测P24抗原 病毒核酸 临床诊断 治疗评价 定性试验 检测DNA 定量试验 即病毒载量,检测RNA CD4 流式细胞仪法 检测CD4+T淋巴细胞 艾滋病实验诊断方法 * * 诊断试剂 窗口期 特 点 金标法、硒标法 5周 35天 敏感性低,容易漏检 明胶颗粒凝集试验(PA) 5周 35天 特异性较好,敏感性不足 ELISA(国产第三代) 3周多 20~25天 普及,稳定性欠佳 ELISA(进口第三代) 3周 18~22天 较为成熟,稳定性好 ELISA(进口第四代) 2周多 16~17天 假阳性率偏高 核酸检测 1周多 10~12天 不用于常规诊断 各种诊断试剂特性 * * 硒标法 金标法 HIV抗体筛查试验 * * 明胶颗粒凝集试验 (Particle agglutination test,PA) * * PA的操作和结果判断 * * 5 450/630nm下测定OD值 混匀,加盖,37℃温育 洗板 3 加入底物 第二次特异性结合 4 加入终止液 1 加入样品 洗板 2 加入酶标记物 加盖,37℃温育 加盖,37℃温育 第一次特异性结合 酶联免疫分析 ELISA(双抗原夹心、两步法) * * 快速法可否单独使用? 《全国艾滋病检测技术规范》(2004版):将PA、dot-EIA、胶体硒法纳入快速检测规范方法,因此可以使用。 有研究指出: 任何一种快速试剂可以筛查出99%以上的阴性样本; 两种快速试剂均为阳性时,可以筛查出98%以上的阳性样本; 两种快速试剂结果不一致时,可用ELISA复检; 单独使用或两种同时使用时,特异性差别无显著意义。 * * ■ 针对各种病毒蛋白的特异抗体 ■ 区分ELISA真阳性与假阳性 ■ 检测HIV-1和HIV-2 HIV抗体确证试验 Western Blot 免疫印迹法 * * 基因名称 代号 功 能 基因产物片段 HIV-1 HIV-2 结构基因 外膜蛋白基因 env 合成外膜蛋白 gp160 gp120 gp41 gp140 gp105
文档评论(0)