选修3.1.ppt

(4)若将细菌B先接种在含有　　　　的培养基上能生长，说明该细菌中已经导入外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因；若将细菌B再重新接种在含有　　　　的培养基上不能生长，则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒。 (5)检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA和是否翻译出生长激素，可采用的技术分别是　　　　、　　　　　　　　　　　　。 【解析】(1)图中过程①是以RNA为模板，通过逆转录法获取目的基因。(2)细菌具有繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少等优点，因此是基因工程中的理想的受体细胞。(3)构建基因表达载体时，需先用限制酶分别切割目的基因和载体，再用DNA连接酶将两者连接起来。(4)质粒A和重组质粒中都有完整的抗氨苄青霉素基因，因此细菌有氨苄青霉素抗性说明该细菌中已经导入外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因；重组质粒中四环素抗性基因内插入了目的基因，不能表达，因此细菌对四环素无抗性则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒。(5)检测mRNA和生长激素(蛋白质)的技术分别是分子杂交和抗原-抗体杂交。 答案：(1)逆转录法(反转录法) (2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 (3)限制性核酸内切　DNA连接 (4)氨苄青霉素　四环素 (5)分子杂交　抗原—抗体杂交 2.(2015·铜仁模拟)chlL基因是蓝藻DNA上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答： (1)与真菌相比较，蓝藻在结构上最主要的特点是　　　　　　　，在功能上最主要的特点是　　　　　　　　　　　。 (2)①②过程中均使用的工具酶有　　　　　　　　。 (3)构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是_________________　　和　　　　　　　　　　。 (4)若含有chlL基因的DNA片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答： ①构建含chlL基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是　　　　　，对　　　　　　　　　进行切割。 ②同时用酶1和酶4切割图乙中的质粒，则产生含有1 800对碱基和 8 200对碱基的两种片段；用图中四种酶同时切割此质粒，则产生含有600对碱基和8 200对碱基的两种片段；若换用酶1和酶3同时切割此质粒，则产生的片段是　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【解析】(1)蓝藻为原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，其体内含有光合色素，能进行光合作用。 (2)表达载体构建时需限制酶和DNA连接酶等工具酶。 (3)由题干信息“构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞”可知，构建重组质粒B的目的在于破坏chlL基因并筛选出变异株细胞。 (4)①由图乙知，获得chlL基因需酶1和酶3对此基因所在的DNA进行切割，同时对质粒也要用同种酶切割处理，以便构建重组质粒A。 ②由题意知四种酶同时切割时含600对碱基的片段共有3个。若用酶1和酶3同时切割时，产生的片段有8 200+600=8 800对碱基；另一片段为600×2=1 200对碱基。 答案：(1)没有以核膜为界限的细胞核　能够进行光合作用 (2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶 (3)破坏chlL基因　操作成功后筛选出该变异株细胞 (4)①酶1和酶3　质粒和含chlL基因的DNA ②含有1 200对碱基和8 800对碱基的两种片段 【加固训练】 1.土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有Ti质粒。Ti质粒是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，其上只有T-DNA片段才能转入植物细胞的基因组。Ti质粒的结构及转化过程如图所示，请分析并回答： (1)为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即去除冠瘿瘤基因，将抗旱基因转移至　　　　片段，然后在一定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的T-DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。 (2)将上述外植体置于一个含有　　　　的选择培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成　　　　后，通过产生不定芽再长出整个植物。 (3)基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在个体水平对上述转基因植物与非转基因植物的　　　　性能进行比较。 【解析】(1)目的基因要插入T-DNA上，外植体与含目的基因的土壤农杆菌混合培养，修饰的T-DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。 (2)Ti质粒含有抗四环素基因，将外植体置于含有四环素的选择培养基中培养筛选，发生转化的外植体能增殖，形成愈伤组织后，通过产生不定芽再长出整个植物。 (3)对转基因植物与非转基因植物的抗旱性能进行比较，是在个体水平。 答案：(1)T-DNA　(2)四环素　愈伤组织　(