抗生素类药物分析__培训课件.ppt

弱酸性环境 ETC 差向四环素 药学院药物分析教研室 强酸性环境 ATC 脱水四环素 药学院药物分析教研室 碱性环境 EATC 异四环素 差向脱水四环素 药学院药物分析教研室 Company Logo 二、 鉴别试验 浓H2SO4反应 （一） 黄色 朱红色 绿 蓝 深紫色 盐酸多西环素 盐酸土霉素 盐酸金霉素 盐酸四环素 4 2 SO H 盐酸美他环素 橙红色 药学院药物分析教研室 Company Logo FeCl3反应 （二） 褐色 橙褐色 深褐色 红棕色 盐酸多西环素 盐酸土霉素 盐酸金霉素 盐酸四环素 3 FeCl 药学院药物分析教研室 Company Logo TLC法 （三） 盐酸土霉素的鉴别 HPLC法 （五） EDTA 克服痕量金属造成的 拖尾现象 (四)IR和UV 比较保留时间 药学院药物分析教研室 Company Logo (一) 有关物质 四环素类抗生素中的有关物质主要是指在生产和贮存过程中易形成的异构杂质、降解杂质(ETC、ATC、EATC)等。ChP2010、USP34-NF29和BP2010均采用HPLC法控制四环素类抗生素中的有关物质。 三、杂质检查 Company Logo (二) 杂质吸光度 四环类抗生素多为黄色结晶性粉末；而异构体、降解产物颜色较深，如差向四环素为淡黄色，因其不稳定又易变成黑色；脱水四环素为橙红色；差向脱水四环素为砖红色。此类杂质的存在均可使四环素类抗生素的外观色泽变深。因此和BP2010均规定了一定溶剂、一定浓度、一定波长下杂质吸光度的限量。 Company Logo ChP2010规定的盐酸四环素的杂质吸光度测定方法：取本品，在20～25℃时加0.8%氢氧化钠溶液制成每1ml中含10mg的溶液，置4cm的吸收池中，自加0.8%氢氧化钠溶液起5分钟时，在530nm的波长处测定，其吸光度不得过0.12(供注射用)。 Company Logo (三) 残留有机溶剂 一些四环素类药物需要控制残留有机溶剂，如ChP和BP规定盐酸多西环素检查乙醇，限量均为4.3%～6.0%。 Company Logo 四、 含量测定 HPLC法 盐酸四环素的测定 系统适用性试验：盐酸四环素、有关 物质及ATC峰间的 分离度均应符合要 求。 定量方法：外标法以峰面积计。 药学院药物分析教研室 Company Logo 第五节 抗生素类药物中高分子 杂质的检查 1.高分子杂质 分子量大于药物本身的杂质总称。 药学院药物分析教研室 Company Logo 蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖的结合物。主要来自于发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。 药物的自身聚合物，来自于生产、贮存过程。可引发过敏。 外源性杂质 内源性杂质 药学院药物分析教研室 Company Logo 2、基本特点－对青霉素而言 青霉噻唑多肽－外源性的（2400～3500） 青霉素聚合物－内源性的（聚合度） 母核参与的聚合反应－N型聚合反应 侧链参与的聚合反应－L型聚合反应 分类 药学院药物分析教研室 Company Logo （1）生产过程中的任何蛋白或碎片都可带入产品中，易与药物形成多肽类杂质 （2）形成的聚合物也可发生不同程度的降解 （3）异构体之间可以相互聚合－L-L、D-D、L-D （4）高分子杂质与生产工艺密切相关 特点 药学院药物分析教研室 Company Logo 高分子杂质的控制方法 （1）高效液相色谱法 （2）凝胶色谱－自身对照外标法 Sephadex G-10 （3）离子交换色谱 凝胶色谱法：利用凝胶的分子筛作用，让药物分子自由的进入到凝胶颗粒内部，而高分子杂质被排阻的原理进行的。故此大分子则先流出色谱柱，小分子后出峰而得以分离。 药学院药物分析教研室 Company Logo 高分子杂质的分析方法 （1）蓝色葡聚糖在高分子分离中的 N＞2500/m，拖尾因子0.75～1.5 （2）峰面积的RSD＜5％ 色谱适用性条件 HPLC系统 简单测定系统 分析方法 药学院药物分析教研室 Company Logo 练习与思考 [A型题] 1. 硫酸链霉素、硫酸青大霉素的鉴别方法是 A.三氯化铁反应 B. 硫色素反应 C. 茚三酮反应 D.与碱性酒石酸铜试液反应 E. 双缩脲反应 Co