课题1菊花的组织培养.pptVIP

你听说过袖珍马铃薯吗？ 从第二年开始为什么菊花的花瓣、花期逐渐缩短，花朵与杭白菊相似？ 上述个大的马铃薯、炫丽的菊花都是利用植物的一块组织，甚至一个细胞通过植物组织培养技术培养成的完整植株。 运用这种技术： ①可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致 ②可以培养出大量不含病毒的幼苗，提高作物的产量 ③可以实现花卉的连续生产，不受开花季节的限制 ④· · · · · · 专题3 植物的组织培养技术 课题1 菊花的组织培养 菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物,是我国的传统名花和世界四大切花之一。 长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖。但是传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长,随着市场需求的急剧增加,已经不能满足市场日益发展的需要。 植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快的特点,可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的试管苗。 植物组织培养： （一）植物组织培养的 理论基础——细胞全能性： 概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成 完整新个体的潜能。 基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有全套遗传物质，都有发育成为完整 个体所必需的全部基因。因为它们都是 由同一个受精卵细胞有丝分裂分化而来。 表达条件： 离体条件 无菌操作 适宜物质的诱导和调节（植物激素） 适宜的营养物质 温度、pH、光照等条件的控制 常用的植物激素： 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势。 激素的使用顺序、使用量及比例影响植物细胞的发育方向。 5．温度、光照、pH的影响： 菊花的组织培养程序： 制备MS固体培养基 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控制在18～22℃。 每日用日光灯光照12h。 2．配制培养基：第五课时 分装到锥形瓶中，每瓶分装50mL或100mL。 ① 配制培养液：配制1LMS培养基时，先将称好的琼 脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入 蔗糖30g，取配制好的大量元素、微量元素、有机 物和植物激素的母液，依次加入，加蒸馏水定容 至1000mL。 ② 调pH： ③培养基的分装: 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因 此不必添加植物激素。 3．灭菌： 将分装好的培养基连同其他 器械一起进行高压蒸汽灭菌。 1．选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝。 （二）外植体消毒： 2．消毒： ① 流水冲洗： 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右。 ② 酒精处理： 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2～3次，持续6～7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。 ③ 消毒液处理： 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1～2min，取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。 （三）接种： 接种前用体积分数为70％的酒精将工作台擦拭一遍，然后点燃酒精灯。因为污染的主要来源是空气中的细菌和孢子。 1．接种室消毒： 2．无菌操作要求： 所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。 3．材料的切取和接种： 将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成0.5～1cm的小段，用镊子夹取菊花茎段接种。 4．接种注意事项： ① 每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为 70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火 焰上烧一遍，冷却后再接种。 ② 外植体在培养基中要分布均匀，放置外植 体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝 卜3～4块，菊花6～8块，也不要太少，以 充分利用培养基中的营养成分和光照条件。 ③ 插入时应注意茎段方向，形态学上端朝上， 形态学下端朝下，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分。 思考：你打算做几组重复？你打算设置 对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说