人类绒毛膜促性腺激素免疫传感器的研制.pdfVIP

第十届全国化学传感器学术会议论文摘要集 B生物传感器 杨光明，谭琳，陈雅倩，卢旭晓，白慧萍，杨云慧’ (云南师范大学化学化工学院 昆明 650092) 摘要：将氯金酸和壳聚糖共沉积在玻碳电板上制备出金一壳聚糖蚋米凝胶膜修饰的电极，并用此凝胶膜成功 固定了人类绒毛膜促性腺激素抗体，研制成无电子媒介的人类绒毛膜促性腺激素免疫传感器．通过循环伏安法和 计时电流法研究免疫传感嚣的电化学特性．考察了电极修饰过程中的抗原，抗体培育时间、测试液．pH值．温 度等实验条件和参数对传感器性能的影响．谊传感嚣在人类绒毛膜促性腺激素为o．25一100mIU／ml的范围内有良 好的线性关系，检测下限为0．ImIU／m1．实验结果表明：该方法提高了抗体的固定量，增强了传感器的灵敏度和 稳定性．将传感嚣用于血清样品中人类绒毛膜促性腺激素的测定，获得满意结果． chorionic 人类绒毛膜促性腺激(human gonadotropin。HCG)是由胎盘滋养层细胞分泌的糖蛋 白激素。HCG分泌量不仅与胎儿的正常发育有关，而且还是葡萄胎，肿瘤，毛绒痛等疾病的征 兆和避孕疫苗的…个理想指标。近年来，由于电化学免疫分析法成功的将免疫反应的i苛选择性和 电化学测定的高灵敏度相结合而越来越受到人们的重视，其测定灵敏度与放射免疫法相近而不需 使用放射性同位素，充分显示了它在临床检测中的优越性和发展前途【1·甜。生物分子的固定、保 持生物活性、直接电子传递是制备电化学免疫传感器的关键技术。导电凝胶膜能满足上述需求， 因此常用于免疫传感器的制备[3,41。 1佥．-壳聚糖纳米凝胶膜修饰的玻碳电极的制备及其形貌表征 ml ml 取5 0．2％壳聚糖溶液和50．5％HAuCl4超声分散3h。取出混合液5ml作为电解液， 在．2．5v恒电压下电沉积5min。电沉积完成后，取出玻碳电极，用蒸馏水冲洗干净，备用。通 过电镜图1可以看到金一壳聚糖纳米凝胶膜呈现出树枝网状结构，由于壳聚糖的生物相容性和金 对生物分子的独特的吸附能力，并且金具有电子传导作用，有利于制备电化学免疫传感器。 国1金一壳聚糖纳米凝胶膜的扫描电镜 2免疫传感器的倒备及其响应特性 取59L Ab)涂于金一壳聚糖纳米凝胶膜修饰的玻碳电极上，置于 10“g／Lp-HCG抗体(p．HCG 40c冰箱中12 mol／L h，晾干，即可将p-HCG抗体(Alb)固定于电极上。干燥后用0．5NaCI溶液和 蒸馏水洗涤3次，在0．1mol／L甘氨酸中、330C恒温封闭30rain，目的是封闭未结合抗体的纳米 凝胶膜的活性位点。每次测量前先在一定量的p-HCG抗原(B．HCGA暑)溶液中33。C恒温培育40 min，然后在酶标抗体(p-HCGAbfl-i11P)中于330C恒温培育40rain，即制得无试剂型酶膜修饰的 moFL 免疫传感器．每次培育完均用0．5 NaCI溶液、蒸馏水清洗，即可用于测试。免疫传感器的 第十届全国化学传感器学术会议论文摘要集 B生物传感器 制备过程见图2。 IKYiAb 7 …·4 一 电0：衩 一二竺!兰二二—-二二二≥ 丫 6 复5 Ⅲ砌AgⅢ叭g ．Q9管～、 耪标抗体聊杯抗体 、_， 州。’一1一二 警4 ——————_．，—■■———_——————_ o · 3 羞