代谢调节理论指导下的核黄素发酵条件.pdfVIP

}7，帜 ，一 第 16卷 无锡 轻 工 大 学学报 V01．16 第4期 JOLRNAL OF WUXI UNIVERSⅡ 0F UGHT INoUSTRY 1997 No 4 代谢调节理论指导卞的核黄素发酵条件 张星元 王 琴 (无锡轻 、物工程摹 _ l~036) 7 摘要 发表了从葡萄耱到棱黄素的整条生物合成途径。根据这条代谢途径和330／／7 ) 突变株的发酵条件试验结果，对阿舒很囊酵母舍成核黄素的过程中碳基质流量在 EMP和HMP逢径中的分配，油和骨胶在棱黄素合成中的不同作用，以及丙酮酸的 氧化能力等与棱黄素过量舍成的关系进行了初步的讨论。 关键词 阿舒假囊酵母l棱黄素生物合成I 谢调节 中图分类号 TQ467．2’ I U 刖 吾 前文…已报道无锡轻工大学从核黄素合成途径及其调节的角度对1株阿舒假囊酵母 ( m础bci nsh~i)进行遗传性能的改良，以60c0辐射的 ．射线为诱变剂，以核黄素台成 代谢的中间产物的结构类似物为“筛子”，从结构类似物抗性突变株中筛选到数株高产核黄 素的突变株，其中杀结核菌素抗性突变株(简称Tub 突变株)130，在与出发菌株同样条件下 发酵，棱黄素产量比出发菌株提高40％以上。 本研究以130突变株为对象，以核黄素合成途径及其调节理论为依据，对核黄素发酵的 工艺条件进行探索的研究，并对研究结果进行理论性探讨。为了表述的方便，首次发表了笔 者综合归纳的从葡萄糖到核黄素的合成途径。 1 材料与方法 1．1 供试菌株 Eren~hcium∞^6 130 1．2 培养基 1) 固体完全培养基 葡萄糖 10．0 g／L；蛋白胨10．0 g／L；麦芽汁 10 0 ml／L；玉 米浆1 0．0Inl／L；NaC11．0g／L；K P04 2．0 g／L；MgS04·7 00．1 5 g／L；琼脂20 L；pH消前 6．8 *麦芽汁的制备按协定糖化法 2j。 2) 发酵培养基(一) 葡萄糖20．0 g／L；蛋白胨15．0 g／L；骨胶10．0 g／L；玉米浆10． 收稿 期：l螂 ．01．20 第一作者：张星元 畀．1944年5月出生．工学萌±，碰教授 2 无 锡 轻工 大 学 学 报 第16卷 pH消前 6．8 3) 发酵培养基(二) 葡萄糖 20．0 g／I ；蛋白胨 5．0 g／I ；骨胶 30．o g／l ；玉米浆 l 5．0 ml／I ；NaCI 1_0 g／T ；KH zPO‘2．0 g／T ；MgSO‘·7H2O 0．15 g／L；豆油 20 0 ml／L； pH消前 8．0 1．3 培养条件 培养温度为28～3O C．试管斜碗菌种培养和摇瓶振荡培养时间均为7 d；培养皿单菌落 分离时间为4 d．摇瓶振荡培养条件为往复式摇床i00 r／rain，振幅8～10 cm，装液量为500 ml三角瓶内装液70m1． 1_4 核黄素发酵单位测定 发酵液经适当稀释后用分光光度法 测定核黄紊发酵单位(mg／I )． 2 结果与讨论 2．1 油促进核黄素台成的机理分析 2．1．1 不同油脂对核黄素产量的影响 核黄紊标准曲线为 一33．49x一1．067；相关系数 r一0．9994、式中： ——核黄紊浓度(mg／L)；x——444 llm处OD值。 在不加油的发酵培养基(一)中分别舔~1：130．0 ml／L的豆油、橄榄油、蓖麻油、菜油、麻油、猪油， 接人种子液发酵7 d，与相同条件不加油的发酵液 作对比，结果如图 1_ 由图1可见，油脂对核黄紊的产量有明显的 促进效果。豆油对核黄素产量的促进效果最为显 著，依次下来为菜油、麻油、橄榄油。这四种油的效 果相差